[發明專利]通過質譜法進行的載脂蛋白E同種型檢測

在審

• 申請號: 201880062552.1
• 申請日: 2018-07-31
• 公開（公告）號: CN111148998A
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發明（設計）人: D·韋柏;N·克拉克
• 申請（專利權）人: 奎斯特診斷投資有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 董志勇

1.一種用于確定樣品中載脂蛋白E(ApoE)表型的方法，所述方法包括：

(a)純化所述樣品中的ApoE；

(b)電離所述樣品中的ApoE以產生一種或多種ApoE離子；

(c)通過質譜法檢測來自步驟(b)的所述離子(一種或多種)；其中從步驟(c)中檢測到的所述離子的身份確定所述樣品中存在所述ApoE等位基因(一種或多種)。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述純化包括液相色譜法。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述液相色譜法包括高效液相色譜法(HPLC)。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述純化包括固相萃取(SPE)。

5.根據權利要求1所述的方法，其中所述電離包括電噴霧電離(ESI)。

6.根據權利要求1所述的方法，其中所述電離包括以正模式電離。

7.根據權利要求1所述的方法，進一步包括添加內標。

8.根據權利要求7所述的方法，其中所述內標是同位素標記的。

9.根據權利要求1所述的方法，其中所述樣品是腦脊液(CSF)。

10.根據權利要求1所述的方法，其中所述樣品是血清。

11.根據權利要求1所述的方法，其中所述方法進一步包括在純化之前消化ApoE。

12.根據權利要求11所述的方法，其中所述消化包括胰蛋白酶消化。

13.根據權利要求11所述的方法，其中所述消化包括微波消化。

14.根據權利要求1所述的方法，其中所述表型是ApoE2/ApoE2。

15.根據權利要求14所述的方法，其中所述ApoE2/ApoE2表型通過質/荷比選自665.72±0.5、835.93±0.5、866.99±0.5和982.08±0.5的碎片離子(一種或多種)的存在來確定。

16.根據權利要求1所述的方法，其中所述表型是ApoE2/ApoE3。

17.根據權利要求16所述的方法，其中所述ApoE2/ApoE3表型通過質/荷比選自374.42±0.5、502.55±0.5、665.72±0.5、835.93±0.5、866.99±0.5和982.08±0.5的碎片離子(一種或多種)的存在來確定。

18.根據權利要求1所述的方法，其中所述表型是ApoE2/ApoE4。

19.根據權利要求18所述的方法，其中所述ApoE2/ApoE4表型通過質/荷比選自374.42±0.5、502.55±0.5、649.74±0.5、665.72±0.5、835.93±0.5、866.99±0.5、892.96±0.5和982.08±0.5的碎片離子(一種或多種)的存在來確定。

20.根據權利要求1所述的方法，其中所述表型是ApoE3/ApoE3。

21.根據權利要求20所述的方法，其中所述ApoE3/ApoE3表型通過質/荷比選自374.42±0.5、502.55±0.5、866.99±0.5和982.08±0.5的碎片離子(一種或多種)的存在來確定。