[發明專利]增強的嵌合抗原受體及其用途

在審

• 申請號: 201880058794.3
• 申請日: 2018-07-25
• 公開（公告）號: CN111432823A
• 公開（公告）日: 2020-07-17
• 發明（設計）人: S·O·安格;E·劉;P·施帕;K·雷茲瓦尼
• 申請（專利權）人: 得克薩斯大學體系董事會
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;C07K14/705;C07K14/71;C07K16/28;C12N5/078
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 劉曉東

本文提供了嵌合抗原受體(CARs)，其中在所述CAR和/或人源化scFv的鉸鏈區中包含截短的EGFRvIII(Ev3)。本文還提供了表達所述CAR的免疫細胞及其在免疫疾病治療中的使用方法。

本申請要求2017年7月25日提交的美國臨時申請序列號62/536,934的優先權，其全部內容通過引用合并于此。

引入序列表

于2018年7月23日創建的名為“UTFCP1331WO.txt”的文件中包含的大小為289KB(在MicrosoftWindows中測量的)的序列表在此通過電子提交方式提交，并通過引用并入本文。

背景

1.領域

本發明總體上涉及免疫學和分子生物學領域。更特別地，本發明涉及增強的嵌合抗原受體(CAR)，例如用于免疫細胞。

2.相關技術描述

盡管可供用于診斷出癌癥的患者的診斷和治療選擇方面有了技術進步，但預后通常仍然很差，許多患者無法治愈。免疫療法有望為診斷出各種腫瘤的患者提供有效而靶向的治療，并有可能根除惡性腫瘤細胞而不損害正常組織。從理論上講，免疫系統的T細胞能夠識別腫瘤細胞特異性的蛋白質模式，并通過多種效應子機制介導它們的破壞。施用表達嵌合抗原受體(CARs)的免疫細胞，例如過繼T細胞療法或NK細胞療法，是一種試圖利用和擴大患者自身免疫細胞的消滅腫瘤的能力，然后將這些效應子以有效消除殘留的腫瘤、但又不損害健康的組織的狀態返回患者的嘗試。通常，CAR包含特異性針對腫瘤相關抗原(TAA)的抗體的單鏈可變區片段(scFv)，所述片段通過鉸鏈和跨膜區與T細胞信號傳導分子的胞質域偶聯。然而，免疫細胞療法的臨床使用中的許多缺點損害了該方法在癌癥治療中的充分利用。因此，仍然需要有用于免疫細胞療法的改進的CAR。

概述

在某些實施方案中，本公開提供了增強的嵌合抗原受體及其用于治療疾病和病癥、包括癌癥和自身免疫病癥的方法。在一個實施方案中，提供了被稱為Ev3(或tEv3)的截短的EGFRvIII，其不包含胞內域或功能性EGF結合結構域。在特定方面，Ev3包含EGFR的截短的結構域1(L1)，截短的結構域2(CR1)，結構域3(L2)和結構域4(CR2)(如圖2B所示)。在一些方面，Ev3可以位于CAR的鉸鏈區中，并且可以用于CAR表達細胞的CAR檢測和/或消融。在一些實施方案中，CAR包括人源化scFv和Ev3鉸鏈。在另一個實施方案中，提供了用于CAR的人源化抗原結合結構域，例如人源化單鏈可變片段(scFv)。進一步的實施方式提供了通過向受試者施用表達所述實施方式的CAR的免疫細胞，例如T細胞或NK細胞，來治療免疫相關疾病的方法。

在另一個實施方案中，提供了一種嵌合抗原受體(CAR)，其在所述CAR的鉸鏈中包含Ev3，其中所述Ev3鉸鏈連接細胞外結構域和至少一個細胞內免疫信號傳導結構域。在一些方面，Ev3鉸鏈包含EGFRvIII的跨膜結構域和非功能性胞外域(ectodomain)。在特定方面，Ev3鉸鏈不包含EGFRvIII胞內域(endodomain)。在一些方面，EGFRvIII的非功能性胞外域基本上不具有與表皮生長因子(EGF)的結合能力。

在一些方面，Ev3鉸鏈包含與SEQ ID NO：2具有至少80％、例如至少81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％的序列同一性的氨基酸序列。在一些方面，所述Ev3鉸鏈包含SEQ ID NO：2的氨基酸序列。