[發明專利]原代培養方法

在審

• 申請號: 201880053730.4
• 申請日: 2018-08-21
• 公開（公告）號: CN111051495A
• 公開（公告）日: 2020-04-21
• 發明（設計）人: 高橋祐生;北野史朗;片山量平;長山聰
• 申請（專利權）人: 凸版印刷株式會社;公益財團法人癌研究會
• 主分類號: C12M3/00
• 分類號: C12M3/00;C12N1/00;C12N5/07
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 白麗

1.一種原代培養方法，其是在體外對從生物體采集的組織中所含的細胞進行原代培養的原代培養方法，其中，

將從生物體采集的組織中的細胞接種至含有構成間質的細胞、且單層的或2個以上的細胞層在厚度方向上層疊的細胞結構體的頂面上，進行培養。

2.根據權利要求1所述的原代培養方法，其中，將從所述生物體采集的所述組織的碎片化物、從所述生物體采集的所述組織的酶處理物、或者由從所述生物體采集的所述組織中回收的細胞接種在所述細胞結構體的所述頂面來進行培養。

3.根據權利要求1或2所述的原代培養方法，其中，所述細胞結構體含有選自成纖維細胞、周細胞、內皮細胞及免疫細胞中的1種以上作為構成所述間質的細胞。

4.根據權利要求3所述的原代培養方法，其中，所述內皮細胞是選自血管內皮細胞及淋巴管內皮細胞中的1種以上。

5.根據權利要求1～4中任一項所述的原代培養方法，其中，所述細胞結構體具備脈管網結構。

6.根據權利要求1～5中任一項所述的原代培養方法，其中，所述細胞結構體的厚度為5μm以上。

7.根據權利要求1～5中任一項所述的原代培養方法，其中，所述細胞結構體的厚度為150μm以上。

8.根據權利要求1～7中任一項所述的原代培養方法，其中，從所述生物體采集的所述組織含有腫瘤組織。

9.根據權利要求8所述的原代培養方法，其中，

在將從所述生物體采集的所述組織進行碎片化之后，從所得的碎片化物中分選出癌細胞，

將分選出的所述癌細胞接種在所述細胞結構體的所述頂面上來進行培養。

10.根據權利要求9所述的原代培養方法，其中，在從所述碎片化物中分選所述癌細胞時，利用選自流式細胞儀、磁性分離、介電泳、尺寸分級及密度梯度分級中的1種以上的手法來分選所述癌細胞。

11.根據權利要求1～10中任一項所述的原代培養方法，其中，通過以下工序來構筑所述細胞結構體：

在陽離子性緩沖液中，將至少含有構成間質的細胞的細胞與強電解質高分子及細胞外基質成分混合，獲得混合物的工序(a)；

將通過所述工序(a)獲得的所述混合物接種在細胞培養容器中的工序(b)；以及

在所述工序(b)后，在所述細胞培養容器中獲得至少含有構成間質的細胞的細胞多層地層疊而成的細胞結構體的工序(c)。

12.一種含原代培養細胞的細胞結構體，其在含有構成間質的細胞、且單層的或2個以上的細胞層在厚度方向上層疊的間質細胞層的頂面上具備由從生物體采集的組織中所含的細胞形成的細胞層。