[發(fā)明專利]T細(xì)胞抗原靶向的嵌合抗原受體(CAR)以及在細(xì)胞療法中的用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201880049109.0
• 申請(qǐng)日: 2018-06-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110944652A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-03-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: H·特倫特·斯賓塞;克里斯托弗·德林;蘇尼爾·雷卡爾;勞倫·弗萊舍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 愛(ài)莫里大學(xué);亞特蘭大兒童保健公司
• 主分類號(hào): A61K35/17
• 分類號(hào): A61K35/17;A61K38/17;C07K14/705;C07K16/28;C12N5/00
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 11204
• 代理人: 王達(dá)佐;洪欣

1.一種治療癌癥的方法，所述方法包括：

從受試者中分離T細(xì)胞；

修飾所述分離的T細(xì)胞，使得T細(xì)胞抗原的表達(dá)降低；

將載體插入所述T細(xì)胞中，其中在使得所述T細(xì)胞表達(dá)抗原識(shí)別結(jié)構(gòu)域從而提供轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞的條件下，所述載體編碼并表達(dá)包含所述T細(xì)胞抗原識(shí)別結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體，其中，與其中所述T細(xì)胞抗原的表達(dá)未改變或降低的T細(xì)胞相比，所述T細(xì)胞抗原的表達(dá)降低導(dǎo)致所述T細(xì)胞上包含所述T細(xì)胞抗原識(shí)別結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體的表達(dá)增加；以及

向所述受試者施用有效量的轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞，其任選地與IL-2組合施用于所述受試者。

2.如權(quán)利要求1的方法，其中所述T細(xì)胞抗原是CD5、CD7或CD3。

3.一種治療癌癥的方法，所述方法包括：

從受試者中分離T細(xì)胞；

修飾所述分離的T細(xì)胞，使得CD5的表達(dá)降低；

將載體插入所述T細(xì)胞，其中在使得所述T細(xì)胞表達(dá)CD5抗原識(shí)別結(jié)構(gòu)域從而提供轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞的條件下，所述載體編碼并表達(dá)包含所述CD5抗原識(shí)別結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體；以及

向所述受試者施用有效量的轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞，其任選地與IL-2組合施用于所述受試者。

4.如權(quán)利要求3所述的方法，其中，與其中所述CD5的表達(dá)未改變或降低的T細(xì)胞相比，CD5的表達(dá)降低導(dǎo)致所述T細(xì)胞上包含CD5抗原識(shí)別結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體的表達(dá)增加。

5.如權(quán)利要求3所述的方法，其中修飾所述分離的T細(xì)胞使得CD5的表達(dá)降低包括將載體插入所述T細(xì)胞中，其中所述載體編碼并表達(dá)Cas核酸酶和指導(dǎo)RNA，所述指導(dǎo)RNA靶向用于切割、切開(kāi)或阻斷所述CD5基因或CD5 mRNA的表達(dá)的序列。

6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中所述指導(dǎo)RNA包含AGCGGTTGCAGAGACCCCAT(SEQ IDNO:5)。

7.如權(quán)利要求3所述的方法，其中修飾所述分離的T細(xì)胞使得CD5的表達(dá)降低包括將mRNA插入所述T細(xì)胞中，其中所述mRNA編碼Cas核酸酶和指導(dǎo)RNA，所述指導(dǎo)RNA靶向用于切割或切開(kāi)CD5基因或CD5 mRNA的序列。

8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中所述指導(dǎo)RNA包含AGCGGTTGCAGAGACCCCAT(SEQ IDNO:5)。

9.如權(quán)利要求3所述的方法，其中修飾所述分離的T細(xì)胞使得CD5的表達(dá)降低包括將載體或mRNA插入所述T細(xì)胞中，其中所述載體或mRNA編碼并表達(dá)能夠減少CD5 mRNA表達(dá)的短發(fā)夾RNA。

10.如權(quán)利要求3所述的方法，其中修飾所述分離的T細(xì)胞使得CD5的表達(dá)降低包括將雙鏈RNA寡核苷酸插入所述T細(xì)胞中，其中所述RNA能夠通過(guò)RNA干擾(RNAi)降低CD5 mRNA表達(dá)。

11.如權(quán)利要求3所述的方法，其中所述T細(xì)胞從所述受試者的自體外周血淋巴細(xì)胞(PBL)獲得。

12.如權(quán)利要求3所述的方法，其中在向所述受試者施用淋巴細(xì)胞去除方案之后，向所述受試者施用有效量的轉(zhuǎn)導(dǎo)的T細(xì)胞。

13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述淋巴細(xì)胞去除方案是非清髓性的。

14.如權(quán)利要求12所述的方法，其中所述淋巴細(xì)胞去除方案包括施用環(huán)磷酰胺、氟達(dá)拉濱或其組合。