[發(fā)明專利]用于制備可移植性軟骨組織的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880048374.7
• 申請日: 2018-06-22
• 公開（公告）號: CN110944684B
• 公開（公告）日: 2022-03-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G·羅爾;C·卡普斯;C·埃申
• 申請（專利權(quán)）人: 科.東股份公司
• 主分類號: C12N5/077
• 分類號: C12N5/077;A61L27/38;G01N33/68
• 代理公司: 中國貿(mào)促會專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 11038
• 代理人: 傅宇昌

1.用于選擇軟骨細(xì)胞以便制備可移植性軟骨組織的方法，其特征在于，在體外測定至少一種從下組中選擇的一致性標(biāo)志物或純度標(biāo)志物：KAL1、NRN1或EBF3，其中與參考基因相比較地測定所述標(biāo)志物，并且測定至少一種從下組中選擇的基因表達(dá)的比例：

2.用于選擇軟骨細(xì)胞以便制備可移植性軟骨組織的方法，其特征在于，在體外測定一致性標(biāo)志物和/或純度標(biāo)志物，一致性標(biāo)志物選自KAL1、CRTAC1這一組，純度標(biāo)志物選自NRN1、EBF3這一組，其中與參考基因相比較地測定所述標(biāo)志物，并且測定至少一種從下組中選擇的基因表達(dá)的比例：

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，為了制備可移植性軟骨組織，使所述軟骨細(xì)胞在第一步驟中以單層培養(yǎng)物進(jìn)行擴(kuò)增，和在第二步驟中聚集成球狀體。

4.根據(jù)前述權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，使所述軟骨細(xì)胞聚集成球狀體，并且挑選球狀體。

5.根據(jù)前述權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，i.)在體外測定具有一致性標(biāo)志物KAL1的以單層培養(yǎng)物的軟骨細(xì)胞，和/或ii.)在體外測定具有至少一種一致性標(biāo)志物CRTAC1的以球狀體的軟骨細(xì)胞。

6.根據(jù)前述權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，另外在體外測定蛋白聚糖。

7.根據(jù)前述權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，另外在體外測定聚集蛋白聚糖。

8.根據(jù)權(quán)利要求7的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，測定至少一種從下組中選擇的基因表達(dá)的比例：

9.根據(jù)權(quán)利要求7的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，測定至少一種從下組中選擇的基因表達(dá)的比例：

10.根據(jù)權(quán)利要求7的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，測定至少一種從下組中選擇的基因表達(dá)的比例：

11.根據(jù)前述權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，相比于總細(xì)胞數(shù)目而言，在擴(kuò)增后經(jīng)分離的軟骨細(xì)胞中或在所獲得的球狀體中的滑膜細(xì)胞的份額少于或等于9％。

12.根據(jù)前述權(quán)利要求1至2中任一項(xiàng)的用于選擇軟骨細(xì)胞的方法，其特征在于，相比于總細(xì)胞數(shù)目而言，在擴(kuò)增后經(jīng)分離的軟骨細(xì)胞中或在所獲得的球狀體中的滑膜細(xì)胞的份額少于或等于5％。

13.經(jīng)分離的通過根據(jù)權(quán)利要求1至12之一的方法可獲得的球狀體。

14.經(jīng)分離的通過根據(jù)權(quán)利要求1至12之一的方法可獲得的球狀體，其特征在于，相比于總細(xì)胞數(shù)目而言，在所述球狀體中的滑膜細(xì)胞的份額少于或等于9％。

15.可移植性軟骨組織，其包含根據(jù)權(quán)利要求14的球狀體。

16.根據(jù)權(quán)利要求15的可移植性軟骨組織在制備用于關(guān)節(jié)軟骨缺陷的治療或自體軟骨細(xì)胞移植的藥物中的用途。