[發明專利]具有突變的CD28共刺激性結構域的嵌合抗原受體

在審

• 申請號: 201880045582.1
• 申請日: 2018-07-06
• 公開（公告）號: CN111212663A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: M·L·達維拉
• 申請（專利權）人: H·李·莫菲特癌癥中心研究所公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N5/071;A61K39/00;C12N15/00;C12N5/16;C07K16/00;C07H21/04
• 代理公司: 余姚德盛專利代理事務所(普通合伙) 33239
• 代理人: 周積德

本文公開可與過繼性細胞轉移一起使用以靶向和殺死癌癥的嵌合抗原受體(CAR)多肽，包含具有例如通過減少CAR?T細胞衰竭來增強CAR?T細胞功能的CD28的細胞質結構域的突變形式的共刺激信號傳導區域。還公開被工程化以表達這些CAR的免疫效應子細胞，例如T細胞或自然殺傷(NK)細胞。因此，還公開向患有腫瘤相關的抗原表達的癌癥的受試者提供抗腫瘤免疫力的方法，所述方法涉及被工程化以表達公開的CAR的所公開的免疫效應子細胞的過繼轉移。

相關申請的交叉引用

本申請要求2017年7月7日提交的美國臨時申請號62/529,919的優先權，其全部內容通過引用合并于此。

序列表

本申請包含以電子形式提交的序列表，該序列表是在2018年7月7日創建的名為“320803_2160_序列表_ST25”的ASCII.txt文件。序列表的內容全文并入本文。

背景技術

手術、放射療法和化學療法已成為治療包括白血病、實體瘤和轉移癌在內的癌癥的標準方法。作為常規癌癥治療的輔助手段，已經研究直接或間接利用人體免疫系統來縮小或根除癌癥的免疫療法(有時稱為生物療法、生物治療法或生物反應調節劑療法)。人們認為，人類免疫系統是用于癌癥治療的未開發資源，一旦正確利用免疫系統的組成部分，就可以開發出有效的治療方法。

抗癌T細胞療法的一項重大進步是嵌合抗原受體(CAR)，它是一種單鏈可變片段(scFv)，其衍生自與T細胞受體(TCR)信號信號結構域融合的抗體(Davila,M.L.,et al.,Oncoimmunology,2012.1(9):1577-1583)。第一代CAR的細胞內結構域僅包含CD3δ，而第二代CAR也包括共刺激性結構域，例如CD28或41BB。這些第二代CAR結構域支持在小鼠中高效殺死腫瘤，并導致對患者的CAR T細胞療法進行臨床評估。據報道，針對B19急性淋巴細胞白血病(B-ALL)的患者，其完全緩解率達到90％，從而證實靶向CD19的CAR T細胞的潛力(Davila,M.L.,et al.,Sci Transl Med,2014.6(224):224ra25；Maude,S.L.,et al.,NEngl J Med,2014.371(16):1507-17)。然而，不良的CAR T細胞持久性和過度的T細胞活化分別導致復發和嚴重的毒性，這表明了解CAR T細胞生物學的關鍵需求(Gangadhar,T.C.and R.H.Vonderheide,Nat Rev Clin Oncol,2014.11(2):91-9)。此外，在所有第二代CAR中都發現了復發和毒性，這表明在CAR中添加共刺激性結構域可提高療效，但以生物并發癥為代價。

發明概述

如本文所公開的，具有CD28共刺激性結構域的CAR T細胞在CM細胞中傾向于低水平的強直信號和耗盡表型，并且突變某些CD28亞結構域不能消除CAR信號或細胞因子的產生。因此，可以通過調節CD28共刺激來改善第二代CAR T細胞功能。

本文公開可與過繼性細胞轉移一起使用以靶向和殺死癌癥的嵌合抗原受體(CAR)多肽。公開的CAR包括共刺激性信號傳導區域，該共刺激性信號傳導區域包括增強CAR-T細胞功能的CD28的細胞質結構域的突變形式。在一些實施方案中，突變形式減少CAR-T細胞的衰竭。CD28結構域包括調節TCR刺激后的信號傳導途徑的3個細胞內亞結構域(YMNM(SEQ IDNO:1)、PRRP(SEQ ID NO:2)和PYAP(SEQ ID NO:3))。在一些實施方案中，公開的CAR包括增強CAR-T細胞功能(例如減少CAR-T細胞衰竭)的這些亞結構域中一個或多個的突變或缺失。在一些實施方案中，CAR多肽還包括增強CAR T細胞功能的CD3δ和/或41BB中的一種或多種缺失或突變。

至于其他CAR，公開的CAR多肽在胞外結構域中包含配體結合結構域，例如可以結合表達腫瘤相關抗原(TAA)的癌細胞的試劑。公開的多肽還可以包含能夠激活免疫效應子細胞的跨膜結構域和胞內結構域。例如，胞內結構域可以包含細胞內信號傳導結構域和任選的一個或多個共刺激信號傳導區域。