[發(fā)明專利]具有突變的CD28共刺激性結(jié)構(gòu)域的嵌合抗原受體

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880045582.1
• 申請日: 2018-07-06
• 公開（公告）號: CN111212663A
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: M·L·達維拉
• 申請（專利權(quán)）人: H·李·莫菲特癌癥中心研究所公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N5/071;A61K39/00;C12N15/00;C12N5/16;C07K16/00;C07H21/04
• 代理公司: 余姚德盛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33239
• 代理人: 周積德

1.嵌合抗原受體(CAR)多肽，包含配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域、跨膜結(jié)構(gòu)域、細胞內(nèi)信號傳導結(jié)構(gòu)域和共刺激信號傳導區(qū)域，其中所述共刺激信號傳導區(qū)域包含增強CAR-T細胞融合的CD28的細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的突變形式。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多肽，其中所述共刺激信號傳導區(qū)域包含缺乏YMNM亞結(jié)構(gòu)域或在所述YMNM亞結(jié)構(gòu)域中具有無效突變的CD28的細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的多肽，其中所述共刺激信號傳導區(qū)域包含缺乏PRRP亞結(jié)構(gòu)域或在所述PRRP亞結(jié)構(gòu)域中具有無效突變的CD28的細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項所述的多肽，其中所述共刺激信號傳導區(qū)域包含缺乏PYAP亞結(jié)構(gòu)域或在所述PYAP亞結(jié)構(gòu)域中具有無效突變的CD28的細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項所述的多肽，其中所述CAR多肽由下式限定：

SP–TAA–HG–TM–CSR–ISD；或

SP–TAA–HG–TM–ISD–CSR

其中“SP”表示信號肽，

其中“TAA”表示腫瘤相關(guān)的抗原結(jié)合區(qū)，

其中“HG”表示和任選的鉸鏈結(jié)構(gòu)域，

其中“TM”表示跨膜結(jié)構(gòu)域,

其中“CSR”表示所述共刺激信號傳導區(qū)域，

其中“ISD”表示細胞內(nèi)信號傳導結(jié)構(gòu)域，和

其中“–”表示二價接頭。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項所述的多肽，其中所述細胞內(nèi)信號傳導結(jié)構(gòu)域包括CD3zeta(CD3δ)信號傳導結(jié)構(gòu)域。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項所述的多肽，其中CD28的細胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域的突變形式減少CAR-T細胞的衰竭。

8.分離的核酸序列，編碼權(quán)利要求1至7中任一項所述的重組多肽。

9.包含權(quán)利要求8所述的分離的核酸序列的載體。

10.包含權(quán)利要求9所述的載體的細胞。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的細胞，其中所述細胞選自αβT細胞、γδT細胞、自然殺傷(NK)細胞、自然殺傷T(NKT)細胞、B細胞、先天淋巴樣細胞(ILC)、細胞因子誘導的殺傷(CIK)細胞、細胞毒性T淋巴細胞(CTL)、淋巴因子激活的殺傷(LAK)細胞、調(diào)節(jié)性T細胞、或其任意組合。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的細胞，其中當CAR的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域與TAA結(jié)合時，所述細胞顯示出抗腫瘤免疫力。

13.一種在患有TAA-表達性癌癥的受試者中提供抗腫瘤免疫力的方法，該方法包括向所述受試者施用有效量的經(jīng)遺傳修飾以表達權(quán)利要求1至7中任一項所述的CAR多肽的免疫效應(yīng)子細胞，從而在哺乳動物中提供抗腫瘤免疫力。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中所述免疫效應(yīng)子細胞選自T細胞、自然殺傷(NK)細胞、細胞毒性T淋巴細胞(CTL)和調(diào)節(jié)性T細胞。

15.根據(jù)權(quán)利要求13或14所述的方法，還包括向所述受試者施用檢查點抑制劑。

16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中所述檢查點抑制劑包括抗PD-1抗體、抗PD-L1抗體、抗CTLA-4抗體或其組合。