[發明專利]制備伊美司他(imetelstat)的改良方法

有效

• 申請號: 201880044657.4
• 申請日: 2018-07-09
• 公開（公告）號: CN110891961B
• 公開（公告）日: 2023-06-30
• 發明（設計）人: J·穆斯利希迪諾格魯;D·加萊;J·E·阿爾巴內澤-沃克
• 申請（專利權）人: 美國杰龍生物醫藥公司
• 主分類號: C07H1/00
• 分類號: C07H1/00;C07H21/04
• 代理公司: 北京龍雙利達知識產權代理有限公司 11329
• 代理人: 孫濤;肖鸝

1.一種合成下式的N3'→P5'硫代氨基磷酸酯寡核苷酸伊美司他(imetelstat)的方法，

所述方法包括

a)提供連接到式(A)的固相支持物的第一個3'-氨基保護的核苷酸，其中

PG是酸不穩定保護基；

b)使受保護的3'-氨基脫保護，形成游離3'-氨基；

c)使所述游離3'-氨基與式(B'_n)的受保護的3'-氨基核苷-5'-O-氰基乙基-N,N-二異丙基氨基亞磷酰胺單體反應，其中n＝2的B'_n為受保護的A，形成核苷間N3'→P5'-亞磷酰胺鍵；

d)使用酰基二硫化物硫化核苷間亞磷酰胺基團，形成N3'→P5'硫代磷酰胺；

e)按連續順序重復11次脫保護步驟b)、偶合步驟c)，其中式(B'_n)的3'-氨基核苷-5'-O-氰基乙基-N,N-二異丙基氨基-亞磷酰胺單體受到保護，其中除了當B為胸腺嘧啶時，單體(B'_n)中的核苷堿基B'是受保護的B，并且其中B_n連續為相應的11個偶合步驟中的核堿基B₃至B₁₃，和硫化步驟d)；

f)去除酸不穩定的保護基PG；和

g)使伊美司他從固相支持物脫保護和裂解；

其特征在于在反應步驟a)至e)的任何一個中均不進行額外的加帽步驟。

2.根據權利要求1所述的方法，其中伊美司他進一步轉化成其鈉鹽。

3.根據權利要求1或權利要求2中任一項所述的方法，其中所述酰基二硫化物選自二苯甲酰基二硫化物、雙(苯乙酰基)二硫化物(PADS)、雙(4-甲氧基苯甲酰基)二硫化物、雙(4-甲基苯甲酰基)二硫化物、雙(4-硝基苯甲酰基)二硫化物和雙(4-氯苯甲酰基)二硫化物。

4.根據權利要求3所述的方法，其中所述酰基二硫化物是PADS。

5.根據權利要求4所述的方法，其中PADS溶解在3-甲基吡啶或2,6-二甲基吡啶與選自乙腈、甲苯、1-甲基吡咯烷酮和四氫呋喃的共溶劑的混合物中。

6.根據權利要求5所述的方法，其中PADS溶解在2,6-二甲基吡啶與乙腈的混合物中。

7.根據權利要求6所述的方法，其中所述PADS溶液在使用前老化4至14小時。

8.根據前述權利要求1-7中任一項所述的方法，其中所述酸不穩定基團PG選自三苯基甲基、對茴香基二苯基甲基和二-對茴香基苯基甲基。

9.根據前述權利要求1-7中任一項所述的方法，其中通過用酸性溶液處理去除所述酸不穩定保護基PG。

10.根據前述權利要求1-7中任一項所述的方法，其中式(B'_n)的單體中的腺嘌呤、胞嘧啶和鳥嘌呤堿基上的堿不穩定保護基選自乙酰基、苯甲酰基、異丁酰基、二甲基甲脒基和二芐基甲脒基。

11.根據前述權利要求1-7中任一項所述的方法，其中使用選自四唑、5-(乙硫基)-1H-四唑、5-(4-硝基-苯基)四唑、5-(2-噻吩基)-1H-四唑、三唑和吡錠氯化物的活化劑進行所述偶合步驟c)。

12.根據前述權利要求1-7中任一項所述的方法，其中通過用堿性溶液處理進行步驟g)。

13.根據權利要求12所述的方法，其中所述堿性溶液是溶解在乙腈中的二乙胺或溶解在醇中的氨水，或兩者的組合。