[發(fā)明專利]用于免疫組化染色的過程記錄玻片有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201880039196.1 | 申請日: | 2018-06-15 |
| 公開(公告)號: | CN110741302B | 公開(公告)日: | 2021-11-16 |
| 發(fā)明(設計)人: | 弗雷德里克·克努特·哈舍;岑子祥 | 申請(專利權)人: | 深圳市諾高實驗器材有限公司 |
| 主分類號: | G02B21/34 | 分類號: | G02B21/34;G01N33/53 |
| 代理公司: | 廣州三環(huán)專利商標代理有限公司 44202 | 代理人: | 熊永強 |
| 地址: | 518125 廣東省深圳市寶安區(qū)新*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 用于 免疫 染色 過程 記錄 | ||
1.一種玻片,包括檢測區(qū)和對照區(qū),其中
所述檢測區(qū)用于通過免疫組化(IHC)或免疫化學(ICC)檢測和/或后續(xù)檢查,而對組織切片或疏松細胞進行處理的空間;以及
所述對照區(qū)具有對照靶標,所述對照靶標反映在所述免疫組化或免疫化學檢測過程的一種或多種中間步驟中存在的可能錯誤,和/或為定性或定量地確定染色組織或細胞的顏色密度提供參考;
將石蠟涂層施加至一種或多種生物材料,所述生物材料選自由所述玻片上的一級靶標、二級靶標、成像參考、和抗原修復監(jiān)視器加載點組成的組;或?qū)⑺鍪炌繉邮┘又翢o機沉積物,所述石蠟涂層的施加包括如下步驟:
(a)在60℃-70℃的溫度范圍下,熔化固體石蠟直至所述固體石蠟為液態(tài);
(b)向步驟(a)得到的產(chǎn)物石蠟中加入脂肪族溶劑,直至獲得飽和混合物;
(c)使步驟(b)獲得的飽和混合物在30-33℃溫度范圍內(nèi)冷卻,然后通過緩慢加入有機溶劑直至獲得基本澄清的液體;
(d)步驟(c)得到的澄清液體的薄膜施加至所述玻片上的所述生物材料或所述無機沉淀物上,以在所述玻片上形成屏蔽涂層;
(e)將沉積的石蠟混合物暴露于紅外線加熱,以熔化和蒸發(fā)釋放的溶劑,從而使所述石蠟混合物恢復到其原始固體狀態(tài)。
2.如權利要求1所述的玻片,所述玻片具有粘合劑涂層,以使所述玻片能夠連接肽、蛋白質(zhì)、糖、脂類或無機小分子。
3.如權利要求2所述的玻片,其中所述粘合劑涂層共價結合至玻璃并存在一種或多種端基,所述端基選自由-ROH、-R(C=O)OH、-RNH3、-R(C=O)NH2和-RNH2組成的組。
4.如權利要求2所述的玻片,其中所述粘合劑涂層具有輕微親水性。
5.如權利要求1或2所述的玻片,其中所述對照區(qū)包含一組或多組一級靶標陣列,所述一級靶標陣列包括一種或多種一級靶標加載點,每個所述一級靶標加載點包含一種或多種一級靶標,所述一級靶標為固定在所述玻片上的抗原肽片段并與抗原蛋白或不改變其抗原特異性的所述抗原蛋白的變體的至少一種的全長或部分相一致。
6.如權利要求5所述的玻片,其中所述一級靶標包括一級抗原靶標和一級抗體靶標,通過用于所述免疫組化或免疫化學檢測的一級抗體,能夠識別一種所述一級靶標加載點中的至少一種所述一級抗體靶標。
7.如權利要求1或2所述的玻片,其中所述一級靶標的肽鏈與載體蛋白通過半胱氨酸殘基偶聯(lián),結合的所述載體蛋白與假蛋白混合以調(diào)節(jié)濃度;
所述載體蛋白選自鑰孔血藍蛋白(KLH)或與二級染色試劑無反應的其他蛋白,所述其他蛋白為卵清蛋白(OVA),所述卵清蛋白來自雞蛋白或馬屬科;
所述一級靶標用固定劑固定,所述固定劑為多聚甲醛或福爾馬林。
8.如權利要求7所述的玻片,其中通過磺基-SMCC交聯(lián)的方式,所述一級靶標的肽鏈與所述載體蛋白通過半胱氨酸殘基偶聯(lián)。
9.如權利要求6所述的玻片,其中所述一級靶標加載點形成梯度靶標密度對,每種所述梯度靶標密度對結合單一反應性抗原;或
每個所述一級靶標加載點由二至十種不同抗原肽片段組成,全部以最大密度。
10.如權利要求9所述的玻片,其中結合肽與中性鑰孔血藍蛋白和4%福爾馬林混合,以制備二至十倍稀釋的梯度靶標密度對系列。
11.如權利要求1或2所述的玻片,其中所述對照區(qū)還包括一組或多組二級靶標陣列,二級靶標陣列包括一種或多種二級靶標加載點,每種所述二級靶標加載點為宿主蛋白和假蛋白按一定比例固定在所述玻片上的混合物;其中
對于相同二級靶標陣列組中的不同二級靶標陣列中的不同二級靶標加載點,所述宿主蛋白相同,所述假蛋白相同或不同;以及
對于不同二級靶標陣列組,所述宿主蛋白不同,所述假蛋白相同或不同。
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