[發(fā)明專利]檢測和量化有機(jī)酸代謝產(chǎn)物的質(zhì)譜測定方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880025818.5
• 申請日: 2018-04-16
• 公開（公告）號: CN110573478B
• 公開（公告）日: 2023-02-28
• 發(fā)明（設(shè)計）人: K·P·亞當(dāng);A·J·湯普森
• 申請（專利權(quán)）人: 梅塔博隆股份有限公司
• 主分類號: C07B61/00
• 分類號: C07B61/00;C07H19/06;C07H19/10
• 代理公司: 中國貿(mào)促會專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 11038
• 代理人: 張小勇

本文描述了一種用于通過質(zhì)譜確定樣品中一種或多種分析物的存在、不存在或量的方法。運(yùn)行時間少于六分鐘。該方法包括在適于從所述一種或多種分析物中的每一種分析物產(chǎn)生可通過質(zhì)譜檢測的一種或多種離子的條件下將樣品置于電離源作用下，其中一種或多種分析物在電離之前被衍生化；在單次進(jìn)樣中通過質(zhì)譜測量來自所述一種或多種分析物中的每一種分析物的一種或多種離子的量；以及使用所測量的一種或多種離子的量來確定樣品中一種或多種分析物中的每一種分析物的量。

相關(guān)申請的交叉引用

本申請要求于2017年4月20日提交的美國臨時專利申請?zhí)?2/487,542的權(quán)益，該臨時申請的全部內(nèi)容通過引用在此并入本文。

背景技術(shù)

提供以下描述本發(fā)明背景的信息以幫助理解本發(fā)明，并且不被認(rèn)為構(gòu)成或描述了本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。

在膳食纖維發(fā)酵期間，結(jié)腸中的細(xì)菌產(chǎn)生短鏈脂肪酸(SCFA)以及乳酸。產(chǎn)生后，SCFA被運(yùn)輸?shù)窖褐校⒈黄鞴傥眨⒆鳛榈孜锖托盘柗肿觼碚{(diào)節(jié)能量穩(wěn)態(tài)。SCFA及其對能量代謝的影響已與多種疾病相關(guān)，包括炎癥性腸病、腸易激綜合癥、腹瀉、代謝綜合癥和癌癥(Han,J.等Analytica Chimica Acta.854(2015)86-94和Rio-Covian,D.等FrontMicrobiol.(2016)7:185)。了解SCFA與能量代謝之間的相互作用可能有助于更好地了解微生物組、代謝及其對疾病的影響。

由于它們的揮發(fā)性，LC-MS不容易檢測到原始狀態(tài)的SCFA。SCFA和其他有機(jī)酸，包括諸如乳酸、丙酮酸等非揮發(fā)性有機(jī)酸以及三羧酸(TCA)循環(huán)的中間體在傳統(tǒng)的反相液相色譜方法中通常很難保留下來，并且在質(zhì)譜檢測中靈敏度降低。因此，通常通過其他方法(例如GC-MS和NMR)的組合來檢測這些分析物。在基于GC的分析中，通常使用兩種單獨(dú)的方法：一種用于分析揮發(fā)性SCFA的方法，另一種用于分析非揮發(fā)性有機(jī)酸的方法，在分析之前需要對其進(jìn)行衍生化。

需要一種可靠且可重現(xiàn)的方法，以一種單一的分析方法來測量揮發(fā)性SCFA和非揮發(fā)性有機(jī)酸(例如乳酸、丙酮酸、TCA循環(huán)中間體)。本文描述的方法可在單次進(jìn)樣中測量樣品的SCFA和關(guān)鍵能量代謝物(乳酸、丙酮酸和TCA循環(huán)中間體)。

發(fā)明內(nèi)容

在本發(fā)明的第一方面，一種用于通過質(zhì)譜確定樣品中一種或多種分析物的存在、不存在或量的方法包括多個步驟。一種或多種分析物選自由乙酸(C2)、丙酸(C3)、丁酸(C4)、異丁酸(C4)、2-甲基丁酸(C5)、異戊酸(C5)、戊酸(C5)、己酸(己酸，C6)、3-甲基戊酸、4-甲基戊酸(異己酸)、乳酸、丙酮酸、富馬酸、琥珀酸、蘋果酸、α-酮基戊二酸、烏頭酸、檸檬酸、異檸檬酸及其組合組成的組。運(yùn)行時間少于六分鐘。該方法包括在適于從所述一種或多種分析物中的每一種分析物產(chǎn)生可通過質(zhì)譜檢測的一種或多種離子的條件下，將樣品置于電離源作用下，其中一種或多種分析物在電離之前被衍生化；在單次進(jìn)樣中通過質(zhì)譜測量來自一種或多種分析物中的每一種分析物的一種或多種離子的量；以及使用所測量的一種或多種離子的量來確定樣品中一種或多種分析物中的每一種分析物的量。

在本發(fā)明的第二方面，一種用于通過質(zhì)譜確定樣品中一種或多種分析物的存在、不存在或量的方法包括多個步驟。一種或多種分析物選自由乙酸(C2)、丙酸(C3)、丁酸(C4)、異丁酸(C4)、2-甲基丁酸(C5)、異戊酸(C5)、戊酸(C5)、己酸(己酸，C6)、3-甲基戊酸、4-甲基戊酸(異己酸)及其組合組成的組。運(yùn)行時間少于六分鐘。該方法包括在適于從所述一種或多種分析物中的每一種分析物產(chǎn)生可通過質(zhì)譜檢測的一種或多種離子的條件下，將樣品置于電離源作用下，其中一種或多種分析物在電離之前被衍生化；在單次進(jìn)樣中通過質(zhì)譜測量來自一種或多種分析物中的每一種分析物的一種或多種離子的量；以及使用所測量的一種或多種離子的量來確定樣品中一種或多種分析物中的每一種分析物的量。