[發(fā)明專利]細胞培養(yǎng)物的制造方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880024869.6
• 申請日: 2018-06-05
• 公開（公告）號: CN110506109A
• 公開（公告）日: 2019-11-26
• 發(fā)明（設計）人: 大橋文哉;伊勢岡弘子;宮川繁;澤芳樹
• 申請（專利權）人: 泰爾茂株式會社;國立大學法人大阪大學
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071;C12N5/10
• 代理公司: 11256 北京市金杜律師事務所
• 代理人: 楊宏軍;焦成美<國際申請>=PCT/JP

1.制造細胞培養(yǎng)物的方法，所述細胞培養(yǎng)物包含從多能干細胞分化誘導而成的目標細胞，

所述方法包括將細胞群以達到匯合的密度或其以上的密度接種的工序，

所述細胞群是使從所述多能干細胞分化誘導為所述目標細胞而得到的胚狀體分散而成的，其含有所述目標細胞及相對于所述目標細胞而言增殖速度相對更快的細胞。

2.如權利要求1所述的方法，其中，達到匯合的密度是由于接觸抑制而實質性地停止細胞的增殖的密度。

3.如權利要求1或2所述的方法，其中，細胞培養(yǎng)物是以高于接種前的細胞群的比例含有目標細胞的細胞培養(yǎng)物。

4.如權利要求1～3中任一項所述的方法，其中，細胞培養(yǎng)物是以低于接種前的細胞群的比例含有相對于所述目標細胞而言增殖速度相對更快的細胞組的細胞培養(yǎng)物。

5.如權利要求1～4中任一項所述的方法，其還包括除去具有腫瘤形成能力的細胞的工序。

6.如權利要求5所述的方法，其中，除去具有腫瘤形成能力的細胞的工序包括使用貝倫妥單抗·維多汀進行處理。

7.如權利要求1～6中任一項所述的方法，其中，多能干細胞為iPS細胞。

8.如權利要求1～7中任一項所述的方法，其中，多能干細胞為人細胞。

9.如權利要求1～8中任一項所述的方法，其中，目標細胞為用于向需要所述目標細胞的對象應用的細胞。

10.如權利要求9所述的方法，其中，目標細胞應用于心臟、肺、肝臟、胰腺、腎臟、大腸、小腸、脊髓、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、骨、眼、皮膚、血管或血液。

11.如權利要求1～10中任一項所述的方法，其中，目標細胞為間充質干細胞、骨骼肌成肌細胞、多能心臟前體細胞、單能心臟前體細胞、心肌細胞、骨骼肌細胞、平滑肌細胞、成血管細胞、上皮細胞、內皮細胞、肺細胞、肝細胞、胰腺細胞、腎細胞、腎上腺細胞、腸道上皮細胞、神經(jīng)干細胞、骨髓間質細胞、神經(jīng)細胞、角膜上皮細胞、角膜內皮細胞、視網(wǎng)膜色素上皮細胞、T細胞、NK細胞、NKT細胞、樹突細胞、或血細胞。

12.如權利要求1～10中任一項所述的方法，其中，目標細胞為心肌細胞。

13.如權利要求1～12中任一項所述的方法，其可得到肌鈣蛋白陽性率為50％～90％的細胞培養(yǎng)物。

14.如權利要求1～13中任一項所述的方法，其可得到Lin28陽性率為0.30％以下的細胞培養(yǎng)物。

15.制造片狀細胞培養(yǎng)物的方法，其包括將通過權利要求1～14中任一項所述的方法得到的細胞培養(yǎng)物進行片化的工序。