[發(fā)明專利]具有一個(gè)羧基的聚乙二醇的純化方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201880022686.0
• 申請(qǐng)日: 2018-03-22
• 公開（公告）號(hào): CN110475800B
• 公開（公告）日: 2021-08-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 平居翠;吉岡宏樹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 日油株式會(huì)社
• 主分類號(hào): C08G65/30
• 分類號(hào): C08G65/30
• 代理公司: 北京奉思知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11464
• 代理人: 鄒軼鮫;石紅艷

提供了一種工業(yè)上可行的純化方法，其能夠有效且高純度地純化具有一個(gè)羧基的聚乙二醇化合物，不產(chǎn)生例如吸附劑或者離子交換樹脂的廢料。制備pH 8至11的聚乙二醇化合物的水溶液。將水溶液和混合有機(jī)溶劑在15℃至50℃的范圍內(nèi)的溫度下混合，使其分層為有機(jī)層和水層。在混合有機(jī)溶劑中，有機(jī)溶劑I的比率為25至60質(zhì)量％，并且有機(jī)溶劑II的比率為75至40質(zhì)量％。有機(jī)溶劑I是選自由甲苯、二甲苯等所組成的組中的烴類溶劑，有機(jī)溶劑II是選自由氯仿等所組成的組中的鹵代烴類溶劑，并且有機(jī)溶劑I與有機(jī)溶劑II的混合比率Y(有機(jī)溶劑I/有機(jī)溶劑II)、混合時(shí)的溫度T(℃)和聚乙二醇化合物的重均分子量M滿足3.11×10^?6M+0.084≤Y–0.0135T≤?1.77×10^?6M+0.404的關(guān)系。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種在醫(yī)學(xué)應(yīng)用中使用的具有一個(gè)羧基的聚乙二醇化合物的純化方法。更具體地，本發(fā)明涉及一種用于獲得高純度的具有一個(gè)羧基的聚乙二醇化合物的純化方法，該具有一個(gè)羧基的聚乙二醇化合物是用于在藥物遞送系統(tǒng)中的化學(xué)修飾用途的活化聚乙二醇并且用作其原材料。

本發(fā)明特別適用于以下醫(yī)學(xué)應(yīng)用，包括：多肽、酶、抗體及其他低分子藥物、包括基因、寡核酸等的核酸化合物、核酸藥物和其他生理活性物質(zhì)的修飾，或者應(yīng)用于例如脂質(zhì)體、聚合物膠團(tuán)或者納米顆粒的藥物遞送系統(tǒng)載體。

背景技術(shù)

聚乙二醇(PEG)廣泛的被認(rèn)知為藥物遞送系統(tǒng)中的標(biāo)準(zhǔn)載體并且至今仍在快速發(fā)展。通過用聚乙二醇對(duì)生理活性物質(zhì)或者例如脂質(zhì)體的藥物修飾，由于聚乙二醇的高水合層和空間排斥效應(yīng)，抑制了藥物被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)的捕獲或者在腎臟中的排泄，并且能夠提高在血液中的循環(huán)并且減弱抗原性。其中，在末端具有羧基的聚乙二醇是特別重要的材料，因?yàn)槠溆米饔糜谂c蛋白質(zhì)的賴氨酸殘基或N端的一級(jí)氨基或者其他活性基團(tuán)形成穩(wěn)定的酰胺鍵從而轉(zhuǎn)化為活性酯的原材料。作為使用具有羧基的聚乙二醇作為原材料的PEG化的制劑，SOMAVERT(注冊(cè)商標(biāo))：PEGVISOMANT(輝瑞)、Mircera(注冊(cè)商標(biāo))：甲氧基聚乙二醇-紅細(xì)胞生成素β(F Hoffmann-La Roche)、Macugen(注冊(cè)商標(biāo))：哌加他尼(Pegaptanib)(Eyetech)等已經(jīng)投放市場(chǎng)。此外，進(jìn)行了許多其他PEG化制劑的臨床實(shí)驗(yàn)，所以已經(jīng)展現(xiàn)了其效用。

作為用于醫(yī)學(xué)應(yīng)用目的的活化聚乙二醇，從通過對(duì)藥物進(jìn)行修飾而制造的藥物的性能和安全性的角度，有著減少雜質(zhì)的需求?，F(xiàn)在，作為具有羧基的聚乙二醇化合物，已經(jīng)開發(fā)了具有各種骨架以及在羧基和聚乙二醇之間具有連接基團(tuán)的具有羧基的聚乙二醇化合物，并且根據(jù)其制造方法各種雜質(zhì)作為副產(chǎn)物產(chǎn)出。下面示出其實(shí)例。

作為具有羧基的直鏈聚乙二醇的制造方法，已經(jīng)報(bào)道了以下方法：非專利文獻(xiàn)1中描述的用重金屬試劑氧化聚乙二醇的末端羥基的方法，專利文獻(xiàn)1中描述的通過邁克爾反應(yīng)結(jié)合聚乙二醇的末端羥基和丙烯酸酯化合物并且隨后進(jìn)行酯水解的方法，專利文獻(xiàn)2中描述的通過威廉森反應(yīng)結(jié)合聚乙二醇的末端羥基和具有離去基團(tuán)的原酸酯化合物并且隨后進(jìn)行水解的方法等。

此外，作為具有一個(gè)羧基的分枝聚乙二醇，專利文獻(xiàn)3中報(bào)道了將甲氧基聚乙二醇引入賴氨酸乙酯的兩個(gè)氨基并且隨后進(jìn)行酯水解的方法等。

然而，上述制造方法中的任一者對(duì)于在聚乙二醇的末端的羧基轉(zhuǎn)化率都不高，并且羧酸純度最高為大約90％。在以此狀態(tài)修飾藥物的情況下，除了想要的PEG化的制劑，還包含了許多雜質(zhì)，例如，未反應(yīng)的藥物或者未反應(yīng)的或者失活的聚乙二醇化合物。PEG化的制劑的純化導(dǎo)致了分離困難的技術(shù)問題和由于藥物產(chǎn)量減少而使生產(chǎn)成本增加的問題。由此，期望在與藥物結(jié)合之前盡可能去除作為雜質(zhì)的聚乙二醇化合物。