[發(fā)明專利]工程化的異源二聚體蛋白質(zhì)

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201880014278.0
• 申請日: 2018-03-01
• 公開（公告）號(hào): CN110382529A
• 公開（公告）日: 2019-10-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: R·塞貝;S·伊里加拉;D·斯凱戈羅
• 申請（專利權(quán)）人: 諾華股份有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/18
• 分類號(hào): C07K16/18;C07K16/28;C07K16/24
• 代理公司: 北京市中咨律師事務(wù)所 11247
• 代理人: 胡晨曦;黃革生

1.一種異源二聚體抗體或其片段，所述異源二聚體抗體或其片段包含至少兩個(gè)Fab，其中至少一個(gè)Fab包含：

(a)在第39位、第147位包含帶電氨基酸并且在第165位包含帶電或中性氨基酸(EU編號(hào))的工程化的重鏈可變結(jié)構(gòu)域(VH)和恒定結(jié)構(gòu)域1(CH1)；以及

(b)在第38位包含帶電氨基酸并且在第124位和第169/170位包含帶電或中性氨基酸(EU編號(hào))的工程化的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域(VL)和恒定結(jié)構(gòu)域(CL)，

其中所述VH和CH1結(jié)構(gòu)域以及所述VL和CL結(jié)構(gòu)域中的所述氨基酸成對地具有相反電荷或?yàn)閹щ姷?中性的，并且相對應(yīng)以形成在靜電方面有利于異源二聚化的界面。

2.如權(quán)利要求1所述的異源二聚體抗體或其片段，其中如通過液相色譜-質(zhì)譜法所確定，實(shí)現(xiàn)至少95％的異源二聚化。

3.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述工程化的VH和CH1結(jié)構(gòu)域在第39位包含酸性氨基酸、在第147位包含堿性氨基酸并且在第165位包含酸性氨基酸，并且其中所述工程化的VL和CL結(jié)構(gòu)域在第38位包含堿性氨基酸、在第124位包含酸性氨基酸并且在第169/170位包含堿性氨基酸。

4.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述工程化的VH和CH1結(jié)構(gòu)域在第39位包含堿性氨基酸、在第147位包含酸性氨基酸并且在第165位包含堿性氨基酸，并且其中所述工程化的VL和CL結(jié)構(gòu)域在第38位包含酸性氨基酸、在第124位包含堿性氨基酸并且在第169/170位包含酸性氨基酸。

5.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述工程化的重鏈可變結(jié)構(gòu)域?qū)儆赩H1、VH2、VH3、VH5或VH6亞型。

6.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述工程化的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域?qū)儆赩κ1或Vκ3亞家族并且在第38位、第124位和第169位包含帶電氨基酸。

7.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述工程化的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域?qū)儆赩λ1、Vλ2或Vλ3亞家族并且在第38位、第124位和第170位包含帶電氨基酸。

8.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的異源二聚體抗體或其片段，包含屬于Vκ1或Vκ3亞家族的工程化的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域和屬于Vλ1、Vλ2或Vλ3亞家族的工程化的輕鏈可變結(jié)構(gòu)域。

9.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的異源二聚體抗體或其片段，包含IgG Fc區(qū)。

10.如權(quán)利要求9所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述IgG Fc區(qū)包含在第336位具有取代的第一CH3區(qū)和在第336位、第368位和第407位具有取代的第二CH3區(qū)。

11.如權(quán)利要求9所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述IgG Fc區(qū)包含在第336位和第354位具有取代的第一CH3區(qū)和在第336位、第368位、第407位和第349位具有取代的第二CH3區(qū)。

12.如權(quán)利要求11所述的異源二聚體抗體或其片段，其中所述第一CH3區(qū)包含取代T366W和S354C并且所述第二CH3區(qū)包含取代T366S、L368A、Y407A和Y349C。