[實用新型]一種可對腦膜炎類型進行初篩的時間分辨熒光免疫層析試紙條

有效

• 申請號: 201822115427.2
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN209979649U
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發明（設計）人: 張明航;蔣帥南;蘇雪峰;趙曉芳;郭向前;王宇峰
• 申請（專利權）人: 江蘇蘇博生物醫學科技南京有限公司;江蘇蘇博生物醫學股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/558;G01N21/64
• 代理公司: 32273 南京蘇創專利代理事務所(普通合伙)
• 代理人: 楊勇

本實用新型公開了一種可對腦膜炎類型進行初篩的時間分辨熒光免疫層析試紙條，包括：樣品結合墊、檢測墊、吸樣墊和底板，樣品結合墊、檢測墊和吸樣墊依次設置在底板上，且樣品結合墊和吸樣墊分別疊壓在檢測墊的兩端上，檢測墊上設有四條檢測線和一條質控線。本實用新型所需樣本量少，靈敏度高，檢測背景信號低，特異性強，線性范圍寬，操作簡便，結果可靠；進一步，通過同時檢測腦脊液中PCT、CRP、ESAT?6?CFP10抗原及隱球菌莢膜多糖抗原的含量，能夠對腦膜炎的類型有一個大致的判斷，可有效減小臨床診斷時因經驗主義出現誤診的可能性，為腦膜炎類型的確診提供了較為準確的免疫學依據。

技術領域

本實用新型涉及一種可對腦膜炎類型進行初篩的時間分辨熒光免疫層析試紙條，屬于生物技術領域。

背景技術

中樞神經系統感染是兒科常見病和多發病，以細菌性腦膜炎和病毒性腦膜炎最為多見。近年來，隨著結核桿菌的基因突變、抗結核藥物研制相對滯后和AIDS病患者的增多，國內外結核病的發病率及病死率逐漸增高。同時，隨著抗生素、免疫抑制劑和皮質激素的廣泛應用，機體菌群失調或免疫功能下降，使得隱球菌性腦膜炎的發病率也明顯升高。由于這幾種腦膜炎表現出來的病癥有著相似性，尤其是結核性腦膜炎和隱球菌性腦膜炎在臨床上表現酷似，容易誤診，病患得不到及時的有效治療從而喪命。因此急需尋找一種能早期診斷及鑒別腦膜炎病因的方法，對治療、預后、轉歸、減少患者出現后遺癥將有極大的臨床意義。

眾多研究表明，在細菌性和病毒性腦膜炎患者中，腦脊液中PCT和CRP的水平均顯著高于健康兒童，這說明腦脊液中PCT和CRP可以作為兒童病毒性和細菌性腦膜炎臨床診斷的指標。由于感染結核分枝桿菌(MTU)體內首先出現結核抗原，而結核抗體則要感染后8周起逐漸產生，因此檢測腦脊液中的MTU分泌特異性抗原可作為快速診斷腦膜活動性結核的有效途徑。在感染早期，致病型結核分枝桿菌一般會分泌大量的特異性蛋白，即6000-早期分泌性抗原靶(ESAT-6)與抗原培養濾液蛋白10(CFP10)，并且這兩種蛋白不存在卡介苗BCG中，故其可以作為活動性結核的標志物。對于隱球菌性腦膜炎，國內多采用腦脊液圖片、阿利新藍染色、墨汁染色和真菌培養等方法，雖然真菌培養是確診隱腦的金標準，但耗時較長，需2-5d，有的真菌需要10d，培養陽性率低；涂片和墨汁染色陽性率較高，尤其是對腦脊液離心后鏡檢，可提高陽性率，但仍然存在漏檢和誤診的情況，造成患者不能及時治療。

實用新型內容

本實用新型提供一種可對腦膜炎類型進行初篩的時間分辨熒光免疫層析試紙條，本實用新型試紙條通過免疫層析法，配合使用熒光免疫分析儀，可以方便、準確且高靈敏度地同時檢測出腦脊液中PCT、CRP、ESAT-6-CFP10抗原、隱球菌莢膜多糖抗原的含量，為腦膜炎類型的初判提供一定的理論依據。

為解決上述技術問題，本實用新型所采用的技術方案如下：

一種可對腦膜炎類型進行初篩的時間分辨熒光免疫層析試紙條，包括：樣品結合墊、檢測墊、吸樣墊和底板，樣品結合墊、檢測墊和吸樣墊依次設置在底板上，且樣品結合墊和吸樣墊分別疊壓在檢測墊的兩端上，檢測墊上設有四條檢測線和一條質控線。

上述試紙條的檢測指標包括腦脊液中PCT、CRP、ESAT-6-CFP10抗原和隱球菌莢膜多糖抗原；樣品結合墊內包被有時間分辨熒光微球標記的抗體，時間分辨熒光微球標記的抗體為檢測指標的抗體。

為了提高檢測的準確性，樣品結合墊上包被有時間分辨熒光微球標記的抗PCT單克隆抗體、抗CRP單克隆抗體、抗ESAT-6-CFP10多克隆抗體和抗隱球菌莢膜多糖單克隆抗體。

為了方便制造，并保證檢測的準確性，時間分辨熒光微球為修飾過的聚苯乙烯微球；聚苯乙烯微球表面修飾官能團為羧基、羥基或環氧基的一種，聚苯乙烯微球的粒徑為100～500nm，優選為180-300nm。

為了提高檢測的靈敏度，時間分辨熒光微球內部填充有1％(w/w)鑭系元素的螯合物，鑭系元素為銪、釤、鈊或鏑中的一種。