[發(fā)明專利]一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法及應(yīng)用

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• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN109796407A
• 公開（公告）日: 2019-05-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 苗志偉;蔡巖;孫波;王學(xué)
• 申請（專利權(quán)）人: 鼎元（天津）生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: C07D229/02
• 分類號: C07D229/02;C07C247/04;C09B57/00;C09K11/06
• 代理公司: 天津企興智財(cái)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 12226
• 代理人: 韓敏

1.一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法，其特征在于：化學(xué)小分子探針一般包括四個功能部位：結(jié)合基團(tuán)、光親和標(biāo)記基團(tuán)、連接部位和報(bào)告基團(tuán)；所述結(jié)合基團(tuán)使探針分子與靶點(diǎn)作用，而不與環(huán)境中的其他生物分子作用；所述光親和標(biāo)記基團(tuán)能夠?qū)⑻结樂肿庸矁r(jià)修飾在靶點(diǎn)蛋白上；所述連接部位能夠保持分子活性及提高標(biāo)記效率；所述報(bào)告基團(tuán)能夠簡單快速識別或純化被標(biāo)記蛋白；所述結(jié)合基團(tuán)通過具體藥物確定，所述光親和標(biāo)記基團(tuán)、連接部位和報(bào)告基團(tuán)能夠通過模塊化制備。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法，其特征在于：

光親和標(biāo)記基團(tuán)的模塊庫制備：

(1)二異丙胺和重蒸的THF溶液,先后滴加正丁基鋰、乙酰乙酸乙酯，加入溴丙炔，通過萃取、減壓蒸餾得到化合物b1；

(2)加入化合物b2、乙二醇對甲苯磺酸和重蒸甲苯，減壓旋蒸去除大部分甲苯溶液，通過萃取、減壓蒸餾、柱層析分離得到目標(biāo)化合物b3；

(3)加入重蒸四氫呋喃，四氫鋁鋰，將化合物b3溶于重蒸四氫呋喃中，緩慢滴入反應(yīng)體系中，反應(yīng)完成用鹽酸水溶液淬滅反應(yīng)，通過濾除、萃取、減壓旋蒸、柱層析分離，得到目標(biāo)化合物b4；

(4)加入對甲苯磺酸，將化合物b5溶于丙酮中，并注入反應(yīng)體系中，反應(yīng)完全用飽和的碳酸氫鈉水溶液淬滅反應(yīng)，通過萃取、減壓旋蒸、柱層析分離，得到較純的目標(biāo)化合物b5；

(5)加入化合物b5，充入氨氣，反應(yīng)過程中將羥胺氧磺酸溶于無水甲醇中，滴入反應(yīng)體系中，將反應(yīng)中間體用二氯甲烷溶解，加入三乙胺，再將碘單質(zhì)溶于二氯甲烷中，滴入，通過減壓旋蒸、柱層析分離，得到較純的目標(biāo)化合物b6；

(6)將碘，咪唑和三苯基膦溶解二氯甲烷中，將化合物b6溶于二氯甲烷中，滴入，反應(yīng)完全后通過萃取三次、減壓旋蒸、柱層析分離，得到較純的目標(biāo)化合物b；

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法，其特征在于：所述光親和標(biāo)記基團(tuán)的模塊庫制備中，充入氬氣，在無水無氧條件下進(jìn)行，并通過TLC監(jiān)測反應(yīng)完全；反應(yīng)完全后通過無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，乙酸乙酯進(jìn)行萃取，以200—300目硅膠為固定相進(jìn)行柱層析分離。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法，其特征在于：

連接基團(tuán)的模塊庫制備：

(1)加入g1，g2和三乙胺溶于DMF溶液中，反應(yīng)完全加入飽和碳酸氫鈉溶液淬滅，通過萃取、洗滌、干燥，減壓旋蒸、柱層析分離，得到較純的目標(biāo)化合物g；

(2)加入g3和Pd/C溶于甲醇溶液中，充入氬氣制作無水無氧環(huán)境，用氫氣置換氬氣，反應(yīng)完全，通過減壓旋蒸、柱層析分離，得到較純的目標(biāo)化合物g4；

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法，其特征在于：所述連接基團(tuán)的模塊庫制備中，通過TLC監(jiān)測反應(yīng)完全；反應(yīng)完全后通過無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，通過二氯甲烷進(jìn)行萃取，飽和食鹽水溶液洗滌，無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，以200—300目硅膠為固定相進(jìn)行柱層析分離。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法，其特征在于：

報(bào)告基團(tuán)的模塊化制備：

(1)加入羅丹明-B，Boc-哌嗪，HOBT，EDCI和三乙胺溶于二氯甲烷溶液中，反應(yīng)完全，加入二氯甲烷，通過洗滌，干燥，減壓旋蒸，柱層析分離，得到較純的目標(biāo)化合物f1；

(2)加入化合物f1溶于二氯甲烷中，將三氟乙酸溶于二氯甲烷中，滴入，反應(yīng)完全，加入飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅反應(yīng)，通過萃取、干燥、減壓旋蒸，得到化合物f2；

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種模塊化制備化學(xué)小分子探針的方法，其特征在于：所述報(bào)告基團(tuán)的模塊化制備中，通過TLC監(jiān)測反應(yīng)完全；反應(yīng)完全后通過無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，通過二氯甲烷進(jìn)行萃取，飽和食鹽水溶液洗滌，無水硫酸鈉進(jìn)行干燥，以200—300目硅膠為固定相進(jìn)行柱層析分離。