[發明專利]一種馬蹄蓮芽眼組織培養方法在審
| 申請號: | 201811639320.6 | 申請日: | 2018-12-29 |
| 公開(公告)號: | CN109526751A | 公開(公告)日: | 2019-03-29 |
| 發明(設計)人: | 吳高殷;王曉;鄒薇薇;魏春芳 | 申請(專利權)人: | 貴州大學 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 貴陽中新專利商標事務所 52100 | 代理人: | 胡緒東 |
| 地址: | 550025 貴州省貴*** | 國省代碼: | 貴州;52 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 外植體 馬蹄蓮 芽眼 組織培養 消毒 篩選 誘導愈傷組織 愈傷組織誘導 分化培養基 生根培養基 分化誘導 生根誘導 消毒過程 愈傷組織 分化苗 生根率 時分化 試管苗 乙醇 增殖 激素 清洗 試驗 培育 | ||
1.一種馬蹄蓮芽眼組織培養方法,其特征在于:該方法包括以下步驟:
(1)將大棚內的馬蹄蓮轉移至室內培養15d,戴上手套從基質中取出洗凈泥炭土,然后用刀片切下芽眼;加入4滴洗潔精在自來水下沖洗30min;轉移至超凈工作臺上進行消毒;
(2)外植體愈傷組織誘導:消毒后的芽眼,用無菌刀片切掉芽眼基部周圍與消毒液接觸的部分組織塊;接種至愈傷組織誘導培養基中,以MS為基本培養基,培養基中添加6-BA+NAA+瓊脂+蔗糖,對芽眼愈傷愈傷組織進行誘導,培養條件:暗培養,25±2℃;
(3)外植體的增殖分化誘導:芽眼愈傷組織在原培養基中進行繼代培養1-2次,使愈傷量增加,然后轉接至分化培養基中進行培養,分化培養基添加6-BA和NAA,培養條件:光照強度2000lux,16h/d,溫度為25±2℃;
(4)分化苗的生根誘導:將白色、乳白色愈傷組織或者有芽點的愈傷組織轉接至原培養基中繼代1-2次,使其愈傷增殖,然后轉至分化培養基中進行分化,以MS為基本培養基,培養基中添加6-BA與NAA,培養條件:光照強度2000lux,16h/d,溫度為25±2℃。
2.根據權利要求1所述的一種馬蹄蓮芽眼組織培養方法,其特征在于:步驟(1)中消毒方法為:75%乙醇30s,0.1%升汞5min和2%NaClO 6min。
3.根據權利要求1所述的一種馬蹄蓮芽眼組織培養方法,其特征在于:步驟(2)中6-BA、NAA、瓊脂和蔗糖的量分別為2mg/L、0.5mg/L、6g/L和30g/L。
4.根據權利要求1所述的一種馬蹄蓮芽眼組織培養方法,其特征在于:步驟(3)中6-BA和NAA的量分別為2mg/L和0.2mg/L。
5.根據權利要求1所述的一種馬蹄蓮芽眼組織培養方法,其特征在于:步驟(4)中NAA的量為0.5-1mg/L。
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