[發(fā)明專利]一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒及生產(chǎn)工藝

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811635863.0
• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN109490533B
• 公開（公告）日: 2022-02-15
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曾憲亮;路愛成;宣善浪
• 申請（專利權(quán)）人: 南京澳林生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/539
• 分類號: G01N33/539;G01N33/573;G01N33/577
• 代理公司: 南京中盟科創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32279
• 代理人: 孫麗君

本發(fā)明的一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2，試劑R1包括如下成分：試劑R2包括如下成分：該胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒即開即用，無需配制，測量重復(fù)性好，檢測靈敏度高，并且長期存放的穩(wěn)定性較好。本發(fā)明還提出一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒的生產(chǎn)工藝。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒，屬于診斷試劑盒技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

胃蛋白酶是一種消化性蛋白酶，由胃部中的胃粘膜主細(xì)胞所分泌，功能是將食物中的蛋白質(zhì)分解為小的肽片段。胃蛋白酶原(PG)是胃液中胃蛋白酶的無活性前體，分為PGⅠ和PGⅡ，胃蛋白酶原經(jīng)胃酸或者胃蛋白酶刺激后形成胃蛋白酶。PGⅠ來源于胃底腺的主細(xì)胞和頸粘液細(xì)胞，PGⅡ則來源與全胃腺(胃賁門腺、胃底腺、胃竇幽門腺)和遠(yuǎn)端十二指腸Brunner氏腺，前列腺和胰腺也產(chǎn)生少量PGⅡ，胃黏膜合成的PGⅡ約為總量的25％。合成后的PG大部分進(jìn)入胃腔，在酸性胃液作用下活化成胃蛋白酶，只有少量(約1％)PG透過胃粘膜毛細(xì)血管進(jìn)入學(xué)循環(huán)。血清PG水平反應(yīng)了不同部位胃粘膜的形態(tài)和功能。PGⅠ是檢測胃泌酸腺細(xì)胞功能的指針，PGⅠ升高意味著胃酸分泌增多，PGⅠ的降低意味著胃酸分泌減少或胃粘膜腺體萎縮。PGⅡ與胃底粘膜病變的相關(guān)性較大(相對于胃竇粘膜)，其升高與胃底腺管萎縮、腸上皮化生或假幽門腺化生、異型增生有關(guān)。PGⅠ/PGⅡ比值進(jìn)行性降低與胃黏膜萎縮進(jìn)展相關(guān)。聯(lián)合測定胃蛋白酶原PGⅠ和PGⅠ/PGⅡ比值可以代替胃底腺粘膜“血清學(xué)活檢”的作用。是檢查手段的革命(定量檢測，減少活檢痛苦和防止組織取樣錯漏)。

目前現(xiàn)有技術(shù)中對于胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)的測定需要比較復(fù)雜的配液過程，并且存放時間受環(huán)境條件影響較大，長期存放的穩(wěn)定性差，靈敏度差，測量重復(fù)性低。

發(fā)明內(nèi)容

為克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提出一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒，即開即用，無需配制，測量重復(fù)性好，檢測靈敏度高，并且長期存放的穩(wěn)定性較好。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2，其中：試劑R1包括如下成分：

試劑R2包括如下成分：

進(jìn)一步地，試劑R1包括如下成分：

試劑R2包括如下成分：

進(jìn)一步地，在試劑R2中，胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗體與羧基膠乳微球偶聯(lián)，羧基膠乳微球的粒徑為20nm～500nm。

進(jìn)一步地，羧基膠乳微球的粒徑為220nm。

進(jìn)一步地，在試劑R2中，胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗體采用抗人類胃蛋白酶原Ⅰ(小鼠)單克隆抗體。

進(jìn)一步地，在試劑R2中，表面活性劑包括膽甾醇異硬脂酸酯、芥酸酰胺。

進(jìn)一步地，試劑R1與試劑R2的體積比為27:5。

本發(fā)明檢驗血清胃蛋白酶原Ⅱ的原理是：樣品中的PGⅡ和被乳狀液粒吸附的抗體發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，即通過使用與抗體共價結(jié)合的膠乳顆粒予以增強免疫沉淀反應(yīng)，形成免疫復(fù)合物。在波長700nm處檢測濁度的變化，濁度的變化程度與樣品中PGⅡ的含量成正比，通過計算得出樣品中的PGⅡ含量。

三羥甲基氨基甲烷緩沖液作為一種生物緩沖劑，為反應(yīng)提供穩(wěn)定的、適宜的PH環(huán)境。

氯化鈉提供一個離子環(huán)境，同時能夠增加試劑中鹽離子效應(yīng)。