[發明專利]一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒及生產工藝

有效

• 申請號: 201811635863.0
• 申請日: 2018-12-29
• 公開（公告）號: CN109490533B
• 公開（公告）日: 2022-02-15
• 發明（設計）人: 曾憲亮;路愛成;宣善浪
• 申請（專利權）人: 南京澳林生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/539
• 分類號: G01N33/539;G01N33/573;G01N33/577
• 代理公司: 南京中盟科創知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32279
• 代理人: 孫麗君

1.一種胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒，其特征在于，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2，所述試劑R1與試劑R2的體積比為27:5，其中：

試劑R1的成分為：

三羥甲基氨基甲烷緩沖液 6.057g/L

氯化鈉 9g/L

吐溫20 1ml/L

聚乙二醇20000 20g/L

疊氮化鈉 1g/L；

試劑R2的成分為：

三羥甲基氨基甲烷緩沖液 3.0285g/L

海藻糖 40g/L

表面活性劑 5ml/L

小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體 500mg/L

疊氮化鈉 1g/L；

在試劑R2中，所述小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體與羧基膠乳微球偶聯，所述小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體與羧基膠乳微球的質量比為0.03:1，所述羧基膠乳微球的粒徑為220nm；

在試劑R2中，所述表面活性劑為2.5ml/L的膽甾醇異硬脂酸酯和2.5ml/L的芥酸酰胺的組合。

2.一種用于生產權利要求1所述胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)檢測試劑盒的生產工藝，其特征在于，包括以下步驟：

S1：配制試劑R1，精確稱量試劑R1的各組分，加入溶劑中攪拌，攪拌均勻后靜置，過濾并除去雜質；

S2：以50mmol/L的MES緩沖液溶解膠乳微球活化劑，配制710mg/ml的膠乳微球活化劑，在聚苯乙烯膠乳微球中加入膠乳微球活化劑進行活化，在25℃下攪拌反應45min，得到活化的膠乳微球溶液；

S3：以50mmol/L的MES緩沖液稀釋小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體，將小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體稀釋液緩慢滴加到步驟S2中制得的膠乳微球溶液中，在25℃下攪拌反應2h，制得偶聯小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體的聚苯乙烯膠乳微球懸濁液，向制得的偶聯小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體的聚苯乙烯膠乳微球懸濁液中加入50g/L的封閉劑，在25℃下封閉60min；

S4：在步驟S3中制得的偶聯小鼠抗人類胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)單克隆抗體的聚苯乙烯膠乳微球懸濁液中加入規定量的表面活性劑、防腐劑、穩定劑、緩沖液，混勻攪拌2h后制得試劑R2；

S5：對試劑R1和試劑R2分別進行半成品檢驗；

S6：清洗包裝器具，烘干，分別灌裝試劑R1和試劑R2；

S7：包裝，成品檢驗，入庫存儲；

所述步驟S1~步驟S4和步驟S6均在十萬級凈化車間內進行。