[發(fā)明專利]一種森林腦炎病毒滅活疫苗及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811627761.4
• 申請(qǐng)日: 2018-12-29
• 公開（公告）號(hào): CN109432413B
• 公開（公告）日: 2019-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫宏亮;劉巖松;劉雙軍;李文娟;劉智慧;王偉;韓慧利;李雨桐;嚴(yán)永男;張偉紅;張穎
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 長(zhǎng)春生物制品研究所有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): A61K39/12
• 分類號(hào): A61K39/12;A61K39/39;A61P31/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體提供一種森林腦炎病毒滅活疫苗及其制備方法，所述疫苗包含有效量的滅活森林腦炎病毒和復(fù)合疫苗佐劑，所述佐劑出人意料地增強(qiáng)了所述疫苗的免疫效果，可顯著降低疫苗抗原的用量，利用本發(fā)明的疫苗免疫后，機(jī)體能夠保持較高的抗體水平并維持較長(zhǎng)的時(shí)間，獲得了有益的免疫效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及森林腦炎病毒滅活疫苗及其制備方法。

背景技術(shù)

森林腦炎(Tick-Borne Encephalitis,TBE)是林區(qū)的常見病及多發(fā)病，森林腦炎的發(fā)病具有季節(jié)性，每年5-7月份發(fā)病，在全球發(fā)病廣泛，我國(guó)主要以東北地區(qū)為主。衛(wèi)生部出臺(tái)的《職業(yè)性森林腦炎診斷標(biāo)準(zhǔn)》中將職業(yè)性森林腦炎定義為勞動(dòng)者在森林地區(qū)的勞動(dòng)活動(dòng)中因被蜱叮咬而感染的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急性病毒性傳染疾病，其由森林腦炎病毒(Tick-borne encephalitis virus，TBEV)(又稱蜱傳腦炎病毒)引發(fā)。

森林腦炎病毒屬黃病毒科黃病毒屬，病毒顆粒呈直徑40-50nm球形，分子量約4×10⁶Da，為單鏈RNA病毒，含有三種結(jié)構(gòu)蛋白，其傳染性易為熱滅活(72℃，10秒)，也可被蛋白酶、甲醛、過氧化氫、乙醚、β-丙內(nèi)酯、Triton X-100等作用而失活。

現(xiàn)有預(yù)防森林腦炎發(fā)生的有效措施即接種疫苗，而常規(guī)的森林腦炎疫苗即森林腦炎病毒滅活疫苗，中國(guó)藥典中規(guī)定將森林腦炎病毒經(jīng)由滅活處理后與適量的氫氧化鋁佐劑混合制備滅活疫苗。

佐劑是一類非特異性免疫增強(qiáng)劑，本身不具有抗原性，可先于抗原或與抗原同時(shí)注入機(jī)體，從而非特異性地增強(qiáng)或者改變機(jī)體對(duì)抗原免疫應(yīng)答的物質(zhì)。目前常用的佐劑按照類型可劃分為以下六類，1)礦物質(zhì)佐劑，主要包括氫氧化鋁、磷酸鋁和磷酸鈣、氫氧化鋅、磷酸鋅、氫氧化鐵凝膠等；2)油佐劑，主要包括弗氏佐劑、MF-59、SAF、白油Span佐劑、佐劑-65等；3)微生物佐劑，主要包括寡脫氧核苷酸(CPGODN)、短小棒狀桿菌(CP)、卡介苗(BCG)、細(xì)菌脂多糖(LPS)、霍亂毒素(CT)等；4)含脂類佐劑，如脂質(zhì)體、免疫刺激復(fù)合體(ISCOM)等；5)中草藥類，如蜂膠、皂苷、多糖等；6)分子佐劑，如細(xì)胞因子、共刺激分子、免疫刺激調(diào)節(jié)分子、趨化因子等。多年來試驗(yàn)研究證實(shí)，佐劑對(duì)疫苗的免疫效果有正向幫助作用，在疫苗的生產(chǎn)中，選擇能夠與疫苗免疫機(jī)制相匹配的佐劑在增強(qiáng)疫苗的免疫效力以及減小副作用方面具有重要的意義。

而如前所述，森林腦炎病毒滅活疫苗中所用的佐劑為鋁鹽，鋁鹽作為疫苗佐劑已有近90年的歷史，鋁佐劑主要包括磷酸鋁、氫氧化鋁和硫酸鋁鉀三種，其中氫氧化鋁和磷酸鋁最為常用，雖然鋁佐劑使用歷史悠久，佐劑輔助機(jī)制相對(duì)清晰，且安全有效、耐受性良好，但其使用仍有很多限制，如接種含鋁佐劑的疫苗可導(dǎo)致一些局部不良反應(yīng)，如紅斑、肉芽腫、接觸性超敏等。另外，有研究認(rèn)為，鋁佐劑傾向于誘導(dǎo)Th2類免疫反應(yīng)，而誘導(dǎo)Th1類免疫反應(yīng)的能力則相對(duì)較弱。針對(duì)鋁佐劑的缺點(diǎn)，為了獲得更好的免疫反應(yīng)，有研究者將鋁佐劑與其他成分聯(lián)合，開發(fā)了復(fù)合佐劑，如ASO4是一種已批準(zhǔn)用于HBV疫苗和HPV疫苗的新型人用含鋁復(fù)合佐劑，其成分為單磷酰脂質(zhì)A和氫氧化鋁的混合物。但是不同種類的復(fù)合佐劑的免疫促進(jìn)作用相差較大。

因此，針對(duì)現(xiàn)有的森林腦炎病毒滅活疫苗有必要進(jìn)一步研究其適合的佐劑，以克服現(xiàn)有的鋁佐劑的缺陷，從而進(jìn)一步增強(qiáng)疫苗的免疫效果以及降低毒副作用。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種復(fù)合疫苗佐劑，所述疫苗佐劑包括氫氧化鋁、黃芩多糖，所述復(fù)合疫苗佐劑能夠大大增強(qiáng)森林腦炎病毒滅活疫苗的免疫效果。

進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了一種森林腦炎病毒滅活疫苗，所述疫苗包括有效量的滅活的森林腦炎病毒以及復(fù)合疫苗佐劑，優(yōu)選地，所述復(fù)合疫苗佐劑包括氫氧化鋁和黃芩多糖。該疫苗的免疫效果顯著優(yōu)于單獨(dú)以氫氧化鋁作為佐劑的森林腦炎病毒滅活疫苗的免疫效果，免疫血清抗體效價(jià)高且持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，副反應(yīng)也小。