[發(fā)明專利]一種人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811621520.9
• 申請(qǐng)日: 2018-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109402051A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王玉娟;徐矯健;葛淑娟;劉燕麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 青島麥迪賽斯生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/0775
• 分類號(hào): C12N5/0775
• 代理公司: 北京科億知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述的無(wú)血清培養(yǎng)基是包括如下濃度組分的α-MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基：谷氨酰胺1-20mM、HEPEs 1-20mM、腐胺10-100μM、轉(zhuǎn)鐵蛋白0.1-10μM、維生素C 10-400μM、胰島素1-10μM、黃體酮1-20nM、皮質(zhì)醇10-200nM、人血白蛋白1-20mg/mL、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子1-10ng/mL、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子1-10ng/mL、速溶蛋白多糖1-50mg/mL。

2.如權(quán)利要求1所述的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述的速溶蛋白多糖的制備方法如下：將螺旋藻干粉清洗，加水后在75-90℃下加熱，然后冷卻至常溫，減壓過(guò)濾分離，用鹽酸調(diào)節(jié)濾液pH值至3-5，放置12-36h，4000rpm，離心15min離心；分離得到的上清液用Na₂CO₃溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，然后噴霧干燥，得到藻蛋白多糖提取物。

3.如權(quán)利要求1所述的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述的培養(yǎng)基中各組分的濃度如下：谷氨酰胺5mM，HEPEs 7mM，腐胺60μM、轉(zhuǎn)鐵蛋白1μM、維生素C 200μM、胰島素6μM、黃體酮20nM、皮質(zhì)醇110nM、人血白蛋白6mg/mL、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2ng/mL、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子4ng/mL、速溶蛋白多糖5mg/mL。

4.如權(quán)利要求1或3所述的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述的胰島素為重組胰島素。

5.如權(quán)利要求1或3所述的無(wú)血清培養(yǎng)基，其特征在于，所述的轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1。

6.權(quán)利要求1或3所述的無(wú)血清培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，是向α-MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，按所述濃度加入谷氨酰胺、HEPEs、腐胺、轉(zhuǎn)鐵蛋白、維生素C、胰島素、黃體酮、皮質(zhì)醇、人血白蛋白、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子、速溶蛋白多糖，混勻，經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾除菌，得到人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的無(wú)血清培養(yǎng)基。

7.權(quán)利要求1或3所述的無(wú)血清培養(yǎng)基在培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞中的應(yīng)用。