[發明專利]一種克白合劑指紋圖譜檢測方法

有效

• 申請號: 201811615925.1
• 申請日: 2018-12-27
• 公開（公告）號: CN109738531B
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發明（設計）人: 黃巧玲;童菊華;王迅;康斯丹;馮瑛;陳丹菲
• 申請（專利權）人: 杭州市第三人民醫院;浙江省中藥研究所有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 黃歡娣;邱啟旺

本發明公開了一種克白合劑指紋圖譜質量控制方法，該方法采用高效液相色譜法，首先將克白合劑待測產品溶液的制備方法及色譜條件進行了優化，包括流動相體系、流動相梯度、提取溶劑等，使得色譜圖分離較好、譜峰較多、給出的色譜峰信息量較大；然后優化了檢測波長，得到基線較平穩的克白合劑樣品色譜圖。該方法為克白合劑的內部質量控制提供了一種有效的檢測手段，可使克白合劑的質量更加穩定，檢測更為科學。

技術領域

本發明屬于指紋圖譜分析技術領域，特別涉及一種克白合劑指紋圖譜檢測方法。

背景技術

克白合劑系用現代先進工藝提煉精制而成的一種中藥復方制劑，由何首烏、枸杞子、補骨脂、菟絲子、女貞子、白芷等16味中藥配伍而成的醫院制劑，具有養血祛風、滋補肝腎的功效，杭州市第三人民醫院在臨床上用于氣滯血瘀、肝腎陰虛型白癜風的治療，取得較好的療效。克白合劑臨床用量比較大，但產品的質量控制手段比較少，檢測水平比較低，目前該產品執行的質量標準為《浙江省醫療機構制劑規范》2005年版，該標準中的檢驗項目限于何首烏、枸杞子的薄層鑒別，以及pH值、相對密度檢查等常規檢驗項目，缺乏對該產品有效成分的量化評價，不能全面有效地控制制劑質量。

因此，采用高效液相色譜法檢測產品的主要有效成份(指標成份)，綜合成有效的指紋圖譜，使該制劑的質量控制手段更嚴密、更精準和科學，為進一步探索和研究制劑的質量提供科學依據。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種克白合劑指紋圖譜檢測方法。

本發明的目的是通過以下技術方案實現的：一種克白合劑指紋圖譜質量控制方法，具體步驟為：(1)制備10批次以上的待測產品溶液，每批次待測產品溶液的制備過程如下：精密量取克白合劑10mL，加入流動相(乙腈-0.2vol％磷酸10:90)稀釋，定容至25mL量瓶中，搖勻，離心，取上層清液，用0.45μm的微孔濾膜過濾，取濾液，即得該批次待測產品溶液；

(2)采用高效液相色譜法，以濃度為0.2vol％磷酸溶液A和乙腈B為流動相，分別獲取所有批次的待測產品溶液的高效液相指紋圖譜；色譜條件為：采用ZORBAX SB C₁₈色譜柱，色譜柱長度為250mm，色譜柱內徑為4.6mm，填料粒徑為5μm；線性梯度洗脫程序為：0～3min內，流動相中B的體積分數為10％；3～20min內流動相中B的體積分數為10％～15％；20～42min，流動相中B的體積分數為15％～25％；42～60min內，流動相中B的體積分數為25％～48％；60～70min內，流動相中B的體積分數為48％～55％；70～75min內，流動相中B的體積分數為55％～10％；流動相流速為1.0mL/min；柱溫為30℃；進樣量為10μL；檢測波長為246nm；

(3)質量穩定性評價：將步驟(2)得到的所有批次的待測產品溶液的指紋圖譜，分別以串行方式融合成一張指紋圖譜，以所有批次待測產品溶液的平均指紋圖譜為對照指紋圖譜，采用相關系數法計算各批次的相似度，相似度均≥0.9的樣品評價為質量穩定的產品。該步驟可以在“中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統軟件2.0版”中分析計算得到。

本發明的有益效果是：該方法為克白合劑的內部質量控制提供了一種簡單、有效的方法，可使克白合劑質量的有效性、穩定性、均一性得到科學評價。

附圖說明

圖1為連續進樣6次獲取同一供試品溶液的指紋圖譜；

圖2為重復6次獲取同一批次的供試品溶液的指紋圖譜；

圖3為同一供試品溶液放置不同時間后的指紋圖譜；

圖4為210nm波長下的克白合劑樣品色譜圖；

圖5為224nm波長下的克白合劑樣品色譜圖；

圖6為246nm波長下的克白合劑樣品色譜圖；

圖7為254nm波長下的克白合劑樣品色譜圖；