[發明專利]誘導質粒拷貝數增加的培養基及其應用在審
| 申請號： | 201811610822.6 | 申請日： | 2018-12-27 |
| 公開（公告）號： | CN111378609A | 公開（公告）日： | 2020-07-07 |
| 發明（設計）人： | 趙方龍;馬艷秋;王嫚;劉凡;吳政憲 | 申請（專利權）人： | 江蘇金斯瑞生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/70 |
| 代理公司： | 南京天華專利代理有限責任公司 32218 | 代理人： | 傅婷婷;夏平 |
| 地址： | 212132 江蘇省鎮*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 誘導 質粒 拷貝 增加 培養基 及其 應用 | ||
1.一種誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述培養基包含胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、氯化鈉和阿拉伯糖。
2.根據權利要求1所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述葡萄糖的濃度為0.1-10g/L，優選為1-5g/L，更優選為0.5-2g/L。
3.根據權利要求1所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述阿拉伯糖的濃度為0.1-10g/L，優選為1-5g/L，更優選為0.3-0.75g/L。
4.根據權利要求1所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述胰蛋白胨的濃度為1-15g/L，優選為5-10g/L。
5.根據權利要求1所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述酵母提取物的濃度為1-15g/L，優選為5-10g/L。
6.根據權利要求1所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述氯化鈉的濃度為1-15g/L，優選為5-10g/L。
7.根據權利要求1-6中任一項所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述培養基中還包含氯化鎂、氯化鉀、氯化鐵或氯化鈣中的一種或多種。
8.根據權利要求1-7中任一項所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述質粒為含有oriV復制起始位點的質粒。
9.根據權利要求8所述的誘導質粒拷貝數增加的培養基，其特征在于，所述質粒為含有oriV復制起始位點的單拷貝質粒，優選為pCCIBAC質粒。
10.一種誘導質粒拷貝數增加的方法，包括以下步驟：
步驟(1)：將質粒轉入大腸桿菌中；
步驟(2)：將步驟(1)得到的大腸桿菌接種到權利要求1-9中任一項所述的培養基中，在適于培養的條件下進行培養。
11.根據權利要求10所述的誘導質粒拷貝數增加的方法，其特征在于，所述步驟(1)中將質粒轉入大腸桿菌感受態中。
12.根據權利要求10所述的誘導質粒拷貝數增加的方法，其特征在于，所述步驟(1)中的大腸桿菌為EPI300或EPI400大腸桿菌。
13.根據權利要求10所述的誘導質粒拷貝數增加的方法，其特征在于，所述步驟(2)中的培養溫度為25-37℃，培養時間為4-6h。
14.根據權利要求1-9中任一項所述的培養基在誘導質粒拷貝數增加中的應用。
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