[發明專利]一種環孢霉素A免疫原的制備方法、環孢霉素A免疫原和抗環孢霉素A特異性抗體在審
| 申請號： | 201811600848.2 | 申請日： | 2018-12-26 |
| 公開（公告）號： | CN109627321A | 公開（公告）日： | 2019-04-16 |
| 發明（設計）人： | 許秀麗;王艷新;常緣榮;周建平 | 申請（專利權）人： | 北京丹大生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/765 | 分類號： | C07K14/765;C07K14/77;C07K14/435;C07K14/795;C07K16/44;G01N33/53 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 101149 北京市通州區中關村科技園區通*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 孢霉 免疫原 制備 特異性抗體 羧基衍生物 羥化 酶聯免疫檢測 特異性識別 交叉反應 碳二亞胺 載體蛋白 草酰氯 氯仿 偶聯 | ||
1.一種環孢霉素A免疫原的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)將環孢霉素A與草酰氯在氯仿中反應，得到環孢霉素A羧基衍生物；
2)將所述步驟1)得到的環孢霉素A羧基衍生物與碳二亞胺、載體蛋白混合、偶聯，得到環孢霉素A免疫原。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)環孢霉素A與草酰氯的質量比為(8～12):(7～7.5)。
3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)環孢霉素A與草酰氯的質量比為10:7.23。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)環孢霉素A的質量與氯仿的體積比為(8～12)g:(35～45)ml。
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟1)反應的時間為4.5～5.5h，所述反應在攪拌下進行，所述攪拌的速度為450～550rpm。
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)環孢霉素A羧基衍生物與碳二亞胺、載體蛋白的質量比為(90～110):(45～55):(90～110)。
7.根據權利要求1或6所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)載體蛋白包括牛血清白蛋白、兔血清白蛋白、人血清白蛋白、牛甲狀腺球蛋白、雞卵清蛋白或血藍蛋白。
8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述步驟2)偶聯的時間為2.5～3.5h。
9.一種環孢霉素A免疫原，其特征在于，所述環孢霉素A免疫原由權利要求1～8任一項所述的制備方法制備得到。
10.一種抗環孢霉素A特異性抗體，其特征在于，將權利要求1～8任一項所述的制備方法制備得到的環孢霉素A免疫原或權利要求9所述的環孢霉素A免疫原免疫動物后得到。
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