[發(fā)明專利]一株米曲霉BLCY-006及其在制備低聚半乳糖中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811596603.7
• 申請日: 2018-12-26
• 公開（公告）號: CN109439552B
• 公開（公告）日: 2020-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李方華;干昭波;竇光朋;邵先豹;張明站;杜倩;楊騰騰
• 申請（專利權(quán)）人: 山東百龍創(chuàng)園生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N9/38;C12P19/00;C12P19/14;C12R1/69
• 代理公司: 37219 濟(jì)南金迪知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 陳桂玲

本發(fā)明涉及一株米曲霉BLCY?006及其在制備低聚半乳糖中的應(yīng)用。米曲霉(Aspergillusoryzae)BLCY?006，2018年12月5日保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號CGMCC No.16965。本發(fā)明還涉及該米曲霉在制備低聚半乳糖中的應(yīng)用。本發(fā)明所述米曲霉BLCY?006可高產(chǎn)β?半乳糖苷酶，酶活可達(dá)到300U/ml，相對于傳統(tǒng)β?半乳糖苷酶活力提高50％以上，同時(shí)還具有耐乳糖和葡萄糖的特性，應(yīng)用于低聚半乳糖生產(chǎn)中可大大提高乳糖轉(zhuǎn)化成低聚半乳糖的能力，顯著降低生產(chǎn)成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一株米曲霉BLCY-006及其在制備低聚半乳糖中的應(yīng)用，屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

米曲霉屬半知菌亞門，絲孢綱，絲孢目，從梗孢科，曲霉屬真菌中的一個(gè)常見種。分布甚廣，主要在糧食、發(fā)酵食品、腐敗有機(jī)物和土壤等處。是我國傳統(tǒng)釀造食品醬和醬油的生產(chǎn)菌種，也可生產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、果膠酶和曲酸等。會引起糧食等工農(nóng)業(yè)產(chǎn)品霉變。

低聚半乳糖(Galactooligosaccharides，GOS)是一種具有天然屬性的功能性低聚糖，其分子結(jié)構(gòu)一般是在半乳糖或葡萄糖分子上連接1～7個(gè)半乳糖基。在自然界中，動物的乳汁中存在微量的GOS，而人母乳中含量較多，嬰兒體內(nèi)的雙歧桿菌菌群的建立很大程度上依賴母乳中的GOS成分。低聚半乳糖具有較強(qiáng)的耐酸性、耐熱性，不被人小腸消化吸收，但可被結(jié)腸菌群發(fā)酵，對腸內(nèi)的雙歧桿菌和乳酸菌具有同時(shí)增殖的作用，且能抑制有害病原菌和腐敗菌生長；不被突變鏈球菌等口腔細(xì)菌利用，可降低齲齒；促進(jìn)鈣、鎂、鉀的吸收，降低鈉吸收；降低總膽固醇和甘油三酯水平，可改善脂質(zhì)代謝；能有效刺激腸道蠕動，減少和防止便秘的發(fā)生，調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)、促進(jìn)腸道健康。低聚半乳糖的安全性已經(jīng)受到廣泛認(rèn)可，2010年日本的低聚半乳糖成為第二大功能性低聚糖產(chǎn)品，2008年9月我國將其列入新資源食品目錄。

當(dāng)前國內(nèi)外生產(chǎn)低聚半乳糖的方法主要是菌種發(fā)酵法和酶轉(zhuǎn)化法，菌種發(fā)酵法是指用產(chǎn)β-半乳糖苷酶的菌種直接發(fā)酵乳糖溶液生產(chǎn)低聚半乳糖，該方法的缺點(diǎn)是生產(chǎn)的低聚半乳糖純度不高，后續(xù)提純困難。酶轉(zhuǎn)化法是指先培養(yǎng)產(chǎn)酶菌種，然后提取β-半乳糖苷酶進(jìn)行酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)低聚半乳糖，該方法目前存在的問題是提取的酶活較低，轉(zhuǎn)化過程中受到反應(yīng)中高含量的副產(chǎn)物葡萄糖的影響造成轉(zhuǎn)化率低，生產(chǎn)成本高居不下。

中國專利文獻(xiàn)CN101691538A公開了一種高純度低聚半乳糖的制備方法，包括米曲霉發(fā)酵，陶瓷膜超濾、納濾分離等產(chǎn)品分離純化步驟。本發(fā)明采用土壤中分離的Aspergillusoryzae米曲霉為出發(fā)菌株，經(jīng)本實(shí)驗(yàn)室誘變篩選所得的高效率轉(zhuǎn)化菌株米曲霉BLB-21(保藏號CGMCCNo.2951)直接發(fā)酵高濃度乳糖溶液。但是該專利仍然存在β-半乳糖苷酶活性較低，制備的低聚半乳糖純度和收率較低等問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一株米曲霉BLCY-006及其在制備低聚半乳糖中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供一種米曲霉BLCY-006的培養(yǎng)方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一株米曲霉(Aspergillus oryzae)BLCY-006，2018年12月5日保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號CGMCC No.16965，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所。

本發(fā)明所述米曲霉(Aspergillus oryzae)BLCY-006的原始菌株分離于山東德州百龍創(chuàng)園低聚半乳糖生產(chǎn)車間附近的土壤，并經(jīng)過反復(fù)多次誘變、篩選，獲得。