[發(fā)明專利]一種切花虎眼萬年青離體培養(yǎng)快繁方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811595790.7
• 申請(qǐng)日: 2018-12-25
• 公開（公告）號(hào): CN109430059A
• 公開（公告）日: 2019-03-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 阮繼偉;屈云慧;楊春梅;田林孟;汪國鮮;吳麗芳;單芹麗;余蓉培;李帆;吳旻
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院花卉研究所;玉溪云星生物科技有限公司
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 云南凌云律師事務(wù)所 53207
• 代理人: 康珉

一種切花虎眼萬年青離體培養(yǎng)快繁方法，通過對(duì)種球預(yù)處理一次得到兩種類型的外植體，經(jīng)過滅菌消毒接種至啟動(dòng)培養(yǎng)基，后進(jìn)行增殖培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、練苗移栽，培養(yǎng)過程中針對(duì)不同類型的外植體給予不同的培養(yǎng)方式和培養(yǎng)條件，大幅度增加了材料基數(shù)，使得種苗產(chǎn)量得到大量提高，提高了生產(chǎn)效益。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種切花虎眼萬年青離體培養(yǎng)快繁的方法。

背景技術(shù)

虎眼萬年青(Ornithogalum caudatum Jacq.)，別名海蔥、鳥乳花，為百合科、虎眼萬年青屬多年生草本植物。目前國際花卉市場涌現(xiàn)出一批虎眼萬年青切花品種，其花枝較長，花朵繁密，切花吸水性佳，瓶插水養(yǎng)觀賞期長達(dá)1個(gè)多月。以其主材插花，配以香石竹、馬蹄蓮、變?nèi)~木、香石竹，素雅淡然，擺放窗臺(tái)和居室，均十分雅致耐觀。

隨著生活水平的不斷提供，人們對(duì)花卉的需求也逐年增強(qiáng)并呈現(xiàn)多元化的趨勢，特別是在鮮切花消費(fèi)領(lǐng)域表現(xiàn)更突出。在原有的國際四大鮮切花(月季、康乃馨、百合、菊花)消費(fèi)的基礎(chǔ)上，消費(fèi)者對(duì)新奇品種、特殊花型等提出了新的消費(fèi)需求。切花虎眼萬年青為特有的蝎尾狀花序，其花色豐富，有白色、黃色、橙色；瓶插期長，室內(nèi)瓶插期是同類型花序中最長的品種，長達(dá)1個(gè)多月，觀賞價(jià)值極高，目前消費(fèi)市場逐漸升溫，種植環(huán)節(jié)對(duì)種苗的數(shù)量需求逐年增大。

虎眼萬年青現(xiàn)有的繁育方式主要是鱗片扦插繁育，但由于其鱗莖的繁殖系數(shù)低,鱗片扦插操作繁瑣，費(fèi)工費(fèi)力，生產(chǎn)效率低下(鱗莖屬有皮鱗莖，鱗片剝?nèi)±щy，鱗莖小鱗片弱，扦插繁殖成苗率低)，無法滿足日益增長的市場需求。而現(xiàn)有的組培快繁體系均是以單一的技術(shù)手段來實(shí)現(xiàn)快速成苗(如：葉片誘導(dǎo)、花柄誘導(dǎo)甚至花苞誘導(dǎo)等)，未能把組培快繁手段運(yùn)用到最佳狀態(tài)，導(dǎo)致無菌系建立到成苗周期延長、每一批次生產(chǎn)的種苗產(chǎn)量低，生產(chǎn)成本高。

發(fā)明內(nèi)容

為解決虎眼萬年青批次生產(chǎn)種苗產(chǎn)量低的技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種切花虎眼萬年青離體培養(yǎng)快繁方法，本發(fā)明所提供的切花虎眼萬年青離體培養(yǎng)快繁方法，包括如下步驟：

(1)外植體的選擇與處理：

將選擇的切花虎眼萬年青目標(biāo)品種的健康種球在4℃低溫條件下放置14～16天至種球長出0.5～1㎝萌芽，清除種球老化的干癟鱗莖皮露出肥厚部分，用手術(shù)刀片沿種球縱向從上到下將種球分割為四瓣，且不劃傷心芽，每瓣的底部帶有相應(yīng)的鱗莖基部，剝離出單個(gè)完整心芽，并將各瓣剝成單片的鱗片，且各鱗片及心芽的底部均帶有相應(yīng)的鱗莖基部，用清水沖洗鱗片和心芽2-3次，用濃度為0.1％w/w的HgCl₂溶液浸泡10min，無菌水沖洗3～4次,再用添加有吐溫20的2％w/w NaClO溶液浸泡10min，無菌水沖洗3～4次，在無菌操作臺(tái)上吹干其表面水分；所述添加有吐溫20的2％w/w NaClO溶液為在100毫升的2％w/w NaClO溶液中添加2滴吐溫20；

(2)無菌系建立與啟動(dòng)培養(yǎng)：

將步驟(1)經(jīng)過處理的鱗片和心芽分別接種到均盛有啟動(dòng)培養(yǎng)基的不同培養(yǎng)瓶中，接種心芽的培養(yǎng)瓶為心芽組，接種鱗片的培養(yǎng)瓶為鱗片組，所述啟動(dòng)培養(yǎng)基為：MS+6-BA1～2mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30g/L+瓊脂6.25g/L，pH為5.8～6.0；①心芽組置于光照條件：光照強(qiáng)度為1500～2000lx，溫度25℃±2℃，光照時(shí)間為10～12h/d，培養(yǎng)14～16d至心芽長大為無根植株，且無根植株的基部分化出幼芽；②鱗片組暗處理14～16d至鱗片傷口處分化出鱗莖芽點(diǎn)，再置于光照條件：光照強(qiáng)度為1500～2000lx，溫度25℃±2℃，光照時(shí)間為10～12h/d，培養(yǎng)28～30d至鱗片分化出幼芽；

(3)增殖培養(yǎng)：