[發明專利]一種小分子肝肽的提取方法

在審

• 申請號: 201811589086.0
• 申請日: 2018-12-25
• 公開（公告）號: CN109371089A
• 公開（公告）日: 2019-02-22
• 發明（設計）人: 盧光明;張曉東;楊廣;楊子豐
• 申請（專利權）人: 河北肽都生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/14;C07K1/34
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 趙寶琴

1.一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟一、將動物肝臟攪碎，加入純化水，攪拌均勻，升溫至54～58℃，加入脂肪酶和中性蛋白酶，攪拌酶解25-35min，得第一酶解液；

步驟二、向所述第一酶解液中加入風味蛋白酶、雞腸消化道蛋白酶和酶激活劑，攪拌均勻，降溫至15～20℃，酶解提取2～3次，每次酶解時間為1～1.5h，合并各次提取液，得第二酶解液；

步驟三、將所述第二酶解液加熱升溫進行酶滅活，分離純化，濃縮，凍干，得小分子肝肽凍干粉。

2.如權利要求1所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟一中，所述純化水的加入量為原料重量的5～6倍；和/或

所述脂肪酶的加入量為原料重量的0.8～1.2％，所述中性蛋白酶的加入量為原料重量的1～1.5％。

3.如權利要求1所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟二中，所述雞腸消化道蛋白酶制備方法包括如下步驟：將雞腸洗凈，制成漿狀，加入雞腸重量8～12倍量的0.9wt％的氯化鈉溶液，4～6℃超聲提取1～2h，離心分離，取上清液，透析除鹽，冷凍干燥，得雞腸消化道蛋白酶。

4.如權利要求1或3所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟二中，所述酶激活劑為維生素B1和硫酸鎂的混合物；其中，所述維生素B1和硫酸鎂的質量比為1:10～15。

5.如權利要求4所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟二中，所述酶激活劑的加入量為所述風味蛋白酶和所述雞腸消化道蛋白酶總重量的0.5～1％。

6.如權利要求5所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟二中，所述風味蛋白酶的加入量為原料重量的0.3～0.5％，所述雞腸消化道蛋白酶的加入量為原料重量的1.5～2％。

7.如權利要求1所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟三中，將所述第二酶解液加熱升溫至90～95℃，保溫10～15分鐘進行酶滅活。

8.如權利要求1所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟三中分離純化的具體步驟為：將滅活后的酶解液依次經臥螺離心機和三相離心機離心，收集上清液，將所述上清液經截留分子量為180-500道爾頓的納濾膜納濾。

9.如權利要求1所述的小分子肝肽的提取方法，其特征在于，步驟三中，所述凍干的具體步驟為：將濃縮液于-43～-47℃預凍1.25～1.35h，得預凍粉；將所述預凍粉于真空度為0.1～0.13mbar，溫度為-20～-42℃的條件下，凍干7.8～8.3h，得第一凍干粉；將所述第一凍干粉解凍后，于真空度為0.15～0.25mbar，溫度為-10～-30℃的條件下，再次凍干2.5-3.5h，得小分子肝肽凍干粉。

10.一種小分子肝肽，其特征在于，所述小分子肝肽由權利要求1-9任一項所述的小分子肝肽的提取方法制得。