[發明專利]一種脾氨肽的制備方法

在審

• 申請號: 201811588231.3
• 申請日: 2018-12-25
• 公開（公告）號: CN109468357A
• 公開（公告）日: 2019-03-15
• 發明（設計）人: 張曉東;楊廣;楊子豐
• 申請（專利權）人: 河北肽都生物科技有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/34
• 代理公司: 石家莊國為知識產權事務所 13120
• 代理人: 王朝

本發明涉及動物脾臟的深加工技術領域，尤其涉及一種脾氨肽的制備方法。該方法采用新鮮牲畜脾臟為主要原料，經過前處理、酶解、固液分離、脫脂純化、納濾、濃縮純化，得到脾氨肽的濃縮液。該濃縮液可經凍干后即得到凍干產品。本發明所提供的制備方法生產周期短、成本低、對環境無污染，而且所得產品安全性高，純度高、活性高、分子量可控，可廣泛應用于食品、特醫食品、保健品、藥品等領域。

技術領域

本發明涉及動物脾臟的深加工技術領域，尤其涉及一種脾氨肽的制備方法。

背景技術

脾臟是機體最大的免疫器官，占全身淋巴組織總量的25％，含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞，是機體細胞免疫和體液免疫的中心。脾臟有濾血的功能，其邊緣區和脾索是濾血的主要場所。脾內的大量巨噬細胞可以清除衰老的血細胞(比如紅細胞)、抗原和異物。侵入機體血內的抗原可在脾臟內激發免疫反應。此外，脾臟還能夠儲藏血液，如，馬的脾臟則存儲了馬體內大約30％的紅細胞。胚胎發育早期，脾臟有造血的功能。但出生后脾臟的造血功能基本消失，僅在部分條件刺激下才能夠恢復。

以動物脾臟為原料生產的脾氨肽能增加CD3細胞的數量，促進T淋巴細胞活性，從而對T淋巴細胞介導的細胞免疫發揮作用。因此，脾氨肽作為免疫體調節劑，能改善細胞免疫功能低下所引起的損傷機體健康的多種情況，提高機體免疫力。現有的用動物脾臟生產脾氨肽的方法中有蛋白酶酶解、色譜分離提取、透析等，分別存在產品分子量偏大、小分子多肽的提取效率低、使用有機溶劑以及操作時間長等問題。

發明內容

針對現有生產脾氨肽的技術存在的產品分子量偏大、小分子多肽的提取效率低的問題，本發明提供一種脾氨肽的制備方法。

為達到上述發明目的，本發明實施例采用了如下技術方案：

一種脾氨肽的制備方法，具體包括以下步驟：

步驟a、將新鮮牲畜脾臟處理成碎塊，作為原料；

步驟b、依次用脂肪酶、內切蛋白酶、外切蛋白酶對所述原料進行酶解；其中所述脂肪酶為微生物脂肪酶和固定化脂肪酶；

步驟c、固液分離，將所得液體進行脫脂純化，納濾，濃縮純化。

本發明所提供的脾氨肽的制備方法中的酶解先采用脂肪酶和內切蛋白酶共同進行酶解，脂肪酶分解了動物脾臟中的脂肪，讓蛋白質成分從脾臟組織里分離出來，再由內切蛋白酶對組織分離出來的蛋白質進行酶解得到脾氨肽，從而提高了從原料中提取肽的提取率，即，從單位重量的脾臟中提取出更多脾氨肽；同時，脂肪酶減少了酶解液中的脂肪成分，使酶解液粘稠度降低，更容易過濾，使更多的脾氨肽進入下一工序，有利于提高脾氨肽的收率，即，終產品中的脾氨肽占脾臟中提取出的脾氨肽的比例；將微生物脂肪酶和固定化脂肪酶結合使用，能夠克服微生物脂肪酶單用的不穩定性，使脂肪分解更徹底；蛋白質大分子經內切蛋白酶的酶解后，肽鏈中的疏水性氨基酸暴露出來，接觸味蕾時會產生苦味，外切蛋白酶能夠切除酶解后肽鍵兩端的苦味基團，使產品口感更好，充分滿足食品和保健品對原料的口感要求；通過納濾能夠分離得到所需分子量的脾氨肽，使產品更適用于藥品或保健食品的要求。本方法中的脾臟來源包括豬、牛、羊等，價廉易得，原料豐富。

本發明所提供的脾氨肽制備方法生產周期短、成本低、不需使用有機試劑、對環境無污染，不產生任何有毒有害物質，所得產品安全性高、純度高、活性高、分子量可控、無異味、無苦味，可廣泛應用于食品、保健食品、藥品等。

優選地，步驟a中將牲畜脾臟處理成碎塊的方法為冷凍后粉碎。冷凍后的脾臟有較高的脆性，易于粉碎。該粉碎方法能夠避免脾氨肽因高溫而受到破壞，更好地保存脾氨肽活性。