[發明專利]一種化學修飾酮胺氧化酶的方法有效
| 申請號: | 201811583956.3 | 申請日: | 2018-12-24 |
| 公開(公告)號: | CN109837255B | 公開(公告)日: | 2023-03-14 |
| 發明(設計)人: | 張伯平;蔡澤浪;鄒佳信;田金艷;陳未明;鄺燕華 | 申請(專利權)人: | 深圳市安帝寶科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/06 | 分類號: | C12N9/06;C12N9/96 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳市南山區西*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 化學 修飾 氧化酶 方法 | ||
1.一種化學修飾酮胺氧化酶的方法,使酮氨氧化酶不易被蛋白酶降解,其特征在于,使用L-丙氨酸-N-羧基環內酸酐(CAS:2224-52-4)、L-酪氨酸-N-羧基酸環內酸酐(CAS:3415-08-5)和L-天冬氨酸-4-芐酯-N-羧基環內酸酐(CAS:13590-42-6)三種化合物的中的一種,對酮胺氧化酶進行化學修飾,步驟包括:
a.用pH 7.2的磷酸鹽緩沖液將酮氨氧化酶配制成5mg/ml的溶液;
b.將L-丙氨酸-N-羧基環內酸酐、L-酪氨酸-N-羧基酸環內酸酐和L-天冬氨酸-4-芐酯-N-羧基環內酸酐中的一種用無水1,4-二氧六環配置成10mg/ml的溶液;
c.在2℃冰水浴和600 rpm的磁力攪拌下,將10ml N-羧基環內酸酐的1,4-二氧六環溶液滴入酮胺氧化酶溶液中,滴加速率為0.2ml/min,滴加完畢后,將混合溶液在2℃攪拌30min;
d.將混合溶液在4000rpm的轉速離心,取上清液,透析,冷凍干燥,制備成N-羧基環內酸酐修飾的酮胺氧化酶粉末。
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