[發明專利]一種HPLC法同時測定四種激素類藥物含量的方法

在審

• 申請號: 201811570773.8
• 申請日: 2018-12-21
• 公開（公告）號: CN109580862A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發明（設計）人: 何梟宇;李立威;王琴
• 申請（專利權）人: 荊門醫藥工業技術研究院;荊楚理工學院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 荊門市首創專利事務所 42107
• 代理人: 董聯生

一種HPLC法同時測定四種激素類藥物含量的方法，包括以下步驟：S1、供試品溶液配制：取經超聲提取法所得樣品溶液，用稀釋劑溶解制成供試品溶液；S2、對照品溶液配制：分別稱取庚酸睪酮、醋酸去甲雄三烯醇酮、群勃龍庚酸酯和癸酸南諾龍四種激素類藥物，用稀釋劑溶解制成對照品溶液；S3、檢測分析：分別取S1中供試品溶液和S2中對照品溶液進樣高效液相色譜儀，進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，確定各成分保留時間，按外標法以峰面積計算供試品溶液中四種激素類藥物的含量。本發明的方法能有效將四種成分分開，靈敏度高、重復性及耐用性好，結果穩定可靠，對于實現食品動物中禁用的人工合成激素類藥物的定量檢測具有重要意義。

技術領域

本發明涉及分析化學領域，具體涉及一種HPLC法同時測定四種激素類藥物含量的方法。

背景技術

獸藥種類繁多，根據用途可分為促生長劑、抗生素、抗寄生蟲藥、鎮靜劑等。許多藥物使用后容易在動物體內殘留并最終通過食物鏈進入人體。人們長期攝入含有獸藥殘留的動物性產品可能導致中毒現象，甚至有致畸、致癌、致突變等效應，嚴重危害人體健康。目前為止，尚未有文獻和公開的方法報道可以同時測定動物組織中庚酸睪酮、醋酸去甲雄三烯醇酮、群勃龍庚酸酯和癸酸南諾龍四種激素類藥物含量的方法，為了滿足社會對食品動物的質量安全需求，開發一種高靈敏度和穩定可靠的檢測方法勢在必行。

發明內容

本發明的目的在于提供一種HPLC法同時測定四種人工合成激素類藥物的方法，本發明的方法可以有效的將四種人工合成激素類藥物分開，且該方法靈敏度高、重復性及耐用性好，結果穩定可靠，對于實現食品動物中禁用的人工合成激素類藥物的定量檢測具有重要意義。

一種HPLC法同時測定四種激素類藥物含量的方法，包括以下步驟：

S1、供試品溶液的配制：取經超聲提取法所得樣品溶液，用稀釋劑溶解制成供試品溶液；

S2、對照品溶液的配制：分別稱取庚酸睪酮、醋酸去甲雄三烯醇酮、群勃龍庚酸酯和癸酸南諾龍四種激素類藥物，用稀釋劑溶解制成對照品溶液；

S3、檢測分析：分別取S1中所述供試品溶液和S2中所述對照品溶液進樣高效液相色譜儀，進行高效液相色譜分析，記錄色譜圖，確定各成分保留時間，按外標法以峰面積計算供試品溶液中四種激素類藥物的含量。

所述高效液相色譜分析采用十八烷基鍵合硅膠為填料的色譜柱，采用水為流動相A、有機溶劑為流動相B進行梯度洗脫后，進入紫外檢測器進行檢測，所述有機溶劑為乙腈或甲醇。

所述稀釋劑為80%乙腈水溶液(V/V)。

高效液相色譜分析的色譜柱的規格為100×4.6mm，5μm，所述色譜柱的柱溫為30-40℃。

高效液相色譜分析中紫外檢測器的檢測波長為254nm或220nm。

梯度洗脫和流動相A、B的體積百分比具體設置如下：

梯度1：0-8min，流動相 A：B=50%-60%：40%-50%，A+B=100%；

梯度2：8-30min，流動相 A：B=15%-20%：80%-85%，A+B=100%；

梯度3：流動相A：B=15%-20%：80%-85%，A+B=100%；

梯度洗脫的流速：1.0ml/min，柱溫：30℃，檢測波長：220nm，進樣體積：10ul。

本發明的方法可以有效的將四種成分分開，且該方法靈敏度高、重復性及耐用性好，結果穩定可靠，對于實現食品動物中禁用的人工合成激素類藥物的定量檢測具有重要意義。

附圖說明

圖1為對照品溶液色譜圖。

圖2為供試品溶液色譜圖。