[發明專利]功能化Fe3

有效

• 申請號: 201811563356.0
• 申請日: 2018-12-20
• 公開（公告）號: CN109632910B
• 公開（公告）日: 2021-09-07
• 發明（設計）人: 聶華貴;王宇;楊植;侯俊婕;孔素珍;詹迎新;鄭仙諾;丁欣慰;黃少銘
• 申請（專利權）人: 溫州大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/26;G01N27/12;B82Y5/00;B82Y15/00;B82Y30/00
• 代理公司: 溫州名創知識產權代理有限公司 33258
• 代理人: 陳加利

本發明提供了一種功能化Fe₃O₄/Au納米復合材料的制備方法及其在真菌毒素檢測的應用。其方法為：將金納米顆粒負載在磁珠表面，5’末端標記巰基的捕獲DNA探針通過Au?S共價鍵修飾在Fe₃O₄/Au表面，加入赭曲霉毒素A(OTA)適配體鏈，與捕獲探針形成穩定的雙鏈結構。本發明的有益成果在于：Fe₃O₄/Au的合成方法操作簡單，易得；Fe₃O₄/Au復合材料結合了磁珠在磁場環境下快速富集，金納米顆粒的高導電性和良好的生物相容性等優勢。Fe₃O₄/Au結合適配體鏈的高選擇性，發展一種新型傳感器，實現對真菌毒素的檢測，操作簡單，靈敏度高。

技術領域

本發明屬于納米復合材料與電化學生物傳感技術結合的研究領域，特別涉及一種Fe₃O₄/Au納米復合材料的制備方法，利用這種材料在磁場下快速富集和表面的金納米顆粒可以通過Au-S鍵修飾DNA的性質，應用于發展一種對真菌毒素檢測的適配體生物傳感技術。

背景技術

赭曲霉毒素A(OTA)是一種霉菌毒素，主要由赤曲霉、碳曲霉和疣狀青霉等真菌種類產生，可污染各種食品，如谷物和谷類制品、咖啡、豆類、牛奶和奶制品、雞蛋、豬肉和肉制品、葡萄酒、啤酒等。它的免疫毒性、肝氧性、致畸性、神經毒性和致癌性使其成為國際癌癥研究機構(IARC)分類的可能的人類致癌物(2B)。歐盟委員會將原生谷物、可溶性咖啡和葡萄酒的OTA最高水平分別定為5.0g μg^-1、10g μg^-1和2.0g L^-1。因此，采用一種非常靈敏的低水平OTA 檢測方法已迫在眉睫。目前，OTA測定最常用的方法是色譜技術包括高效液相色譜法(HPLC)耦合熒光檢測(FD)或質譜(MS)，氣相色譜法(GC)以及薄層色譜法 (TLC)。所有這些方法都需要經過專門培訓的人員和高昂的設備成本。

近年來，又發展了酶聯免疫吸附測定(ELISA)、表面等離子體共振(SPR) 等方法用來檢測食物中含有的赭曲霉毒素A。盡管這些方法比較靈敏，簡單，但這些方法都需要一個穩定的抗體來源，而且耗時還比較久、花費也比較高。

因此，迫切需要發展一種簡單快捷、耗時短、靈敏度高的檢測方法來檢測食品中赭曲霉毒素A的含量。

發明內容

本發明實施例所要解決的技術問題在于，提供一種負功能化Fe₃O₄/Au納米復合材料的制備方法及其在真菌毒素檢測的應用。

為實現上述目的，本發明的第一個發明目的是提供一種功能化Fe₃O₄/Au納米復合材料的制備方法，其技術方案是：將氨基修飾的Fe₃O₄磁珠培養在氯金酸的溶液中過夜，磁吸去除上清液，加入還原劑鹽酸羥胺，在磁珠表面生長金種子，然后同時緩慢加入氯金酸和鹽酸羥胺，使磁珠表面的金種子長大，制得負載金納米顆粒的磁珠納米復合材料，表征為Fe₃O₄/Au納米復合材料。

進一步設置是還需重復多次以下步驟：緩慢加入氯金酸和鹽酸羥胺，使磁珠表面的金種子長大。

進一步設置是還包括以下步驟：

(1)1mL Fe₃O₄磁珠用0.05％Tween PH 8.5氨水溶液磁吸洗滌5次進行活化，加入36mL 0.05％Tween PH 8.5氨水和1.4mL 1wt％HAuCl₄，溶液置于反應容器中，置于搖床過夜；