[發(fā)明專利]一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811562738.1
• 申請日: 2018-12-20
• 公開（公告）號: CN109575914B
• 公開（公告）日: 2021-07-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馬驍馳;馮磊;崔京南;田象閣;田鎮(zhèn)豪;寧靜;王超;霍曉奎;于振龍;孫成鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 大連醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C12Q1/00
• 分類號: C12Q1/00;C09K11/06;C07D311/82;G01N21/64
• 代理公司: 大連星海專利事務(wù)所有限公司 21208
• 代理人: 楊翠翠

1.一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針非疾病診斷和治療方法的應(yīng)用，其特征在于：該探針底物可被N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2特異性催化，使探針底物中的氨基被乙酰化，探針結(jié)構(gòu)式如式（1）所示，

該探針底物為9-(4-氨基苯基)-3,6-雙(二乙氨基)占噸翁醋酸鹽；

該探針底物的應(yīng)用為：采用9-(4-氨基苯基)-3,6-雙(二乙氨基)占噸翁醋酸鹽作為N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2的特異性底物，進(jìn)行結(jié)合反應(yīng)，通過定量檢測單位時間內(nèi)的代謝產(chǎn)物的生成率來定量測定不同生物體系中N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2的活性。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針非疾病診斷和治療方法的應(yīng)用，其特征在于：體外孵育反應(yīng)條件為：底物濃度介于1/10~10 K_m之間；孵育體系pH介于5.5 ~ 10.5之間；反應(yīng)溫度介于20 ~ 60 ^oC之間。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針非疾病診斷和治療方法的應(yīng)用，其特征在于：所述生物體系為重組表達(dá)N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2、細(xì)胞樣品、人或動物組織、植物、微生物。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針非疾病診斷和治療方法的應(yīng)用，其特征在于：所述底物消除率或產(chǎn)物的生成率低于20%。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針非疾病診斷和治療方法的應(yīng)用，其特征在于：該探針底物的酶代謝產(chǎn)物具有熒光，檢測條件為激發(fā)波長530 nm，最大發(fā)射波長為580 nm。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針非疾病診斷和治療方法的應(yīng)用，其特征在于：該探針底物還可用于N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2抑制劑的快速篩選及抑制能力的定量評價。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種檢測N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2熒光探針非疾病診斷和治療方法的應(yīng)用，其特征在于：該探針底物也可作為載體及動物整體N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2的探針底物，評估N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2的個體及種屬差異。