[發明專利]用于抗壞血酸檢測的時間分辨熒光探針的制備方法

有效

• 申請號: 201811562271.0
• 申請日: 2018-12-20
• 公開（公告）號: CN109575918B
• 公開（公告）日: 2021-10-26
• 發明（設計）人: 王海濤;劉赫非;謝明征;江子橙;韓非;李昱;程沙沙;譚明乾
• 申請（專利權）人: 大連工業大學
• 主分類號: C09K11/68
• 分類號: C09K11/68
• 代理公司: 大連科技專利代理有限責任公司 21119
• 代理人: 郭日志

本發明公開了一種用于抗壞血酸檢測的時間分辨熒光探針的制備方法，包括以下步驟：A、將氧化鍺粉末與氫氧化鈉溶液混合，氧化鍺與氫氧化鈉物充分攪拌后制得鍺酸鈉溶液；B、將鍺酸鈉溶液與硝酸鋅、硝酸鎵和硝酸鉻在常溫下充分混合；C、向上述溶液中加入氨水，調整反應體系pH；D、將上述溶液轉移到水熱合成釜中，于高溫下反應；E、反應結束后自然冷卻，冷凍干燥后即得到時間分辨熒光的納米粒子；F、以高錳酸鉀、十六烷基三甲基溴化鉀、嗎琳乙磺酸、氫氧化鈉為原料，室溫下制備MnO₂納米片水溶液；G、時間分辨熒光的納米粒子與MnO₂納米片混合后即為用于抗壞血酸檢測的時間分辨熒光探針。本發明通過時間分辨技術同時對波長和時間兩個參數進行信號分辨，扣除樣品自體熒光，能夠實現對靶標的高靈敏分析測定；時間分辨熒光納米材料的制備方法簡單易行，成本低，穩定性較好。

技術領域

本發明涉及一種用于抗壞血酸檢測的時間分辨熒光探針的制備方法。

背景技術

抗壞血酸，通常也被稱為維生素C，在水果和蔬菜中含量豐富，抗壞血酸可以作為酶的輔助因子、還原劑、神經遞質相關酶的組成成分和必要的營養因子，對維持人類正常生理功能十分重要，因此，分析食品中抗壞血酸的含量十分重要，而目前傳統的抗壞血酸含量檢測方法主要依賴大型設備，檢測設備昂貴、操作繁瑣且非常耗時，很難滿足對現代食品安全檢測技術快速、靈敏、便捷的要求，同時，作為快速分析檢測中常見的一種信號模式，傳統的熒光探針存在兩方面的問題：（1）有機分子抗光漂白性差；（2）待測樣本中自發熒光的干擾。這導致樣品前處理復雜，制約了熒光分析技術在實際樣品中檢測的應用和發展。

發明內容

本發明的目的是提供一種用于抗壞血酸檢測的時間分辨熒光探針的制備方法。

本發明為實現上述目的所采用的技術方案是：一種用于抗壞血酸檢測的時間分辨熒光探針的制備方法，包括以下步驟：

A、制備鍺酸鈉，將氧化鍺粉末與氫氧化鈉溶液混合，氧化鍺與氫氧化鈉物充分攪拌后制得鍺酸鈉溶液；

B、將鍺酸鈉溶液與硝酸鋅、硝酸鎵和硝酸鉻在常溫下充分混合；

C、向上述溶液中加入氨水，調整反應體系pH；

D、將上述溶液轉移到水熱合成釜中，于高溫下反應；

E、反應結束后，自然冷卻，產物水洗至中性，冷凍干燥后即得到具有時間分辨熒光的納米粒子；

F、將高錳酸鉀溶解于去離子水中，向其中加入十六烷基三甲基溴化鉀，然后加入嗎琳乙磺酸與氫氧化鈉混合液，充分攪拌，將得到的棕黑色混合液進行離心收集沉淀，去離子水沖洗沉淀復溶，得到MnO₂納米片水溶液；

G、時間分辨熒光的納米粒子與MnO₂納米片混合后即為用于抗壞血酸檢測的時間分辨熒光探針。

所述步驟A中氧化鍺與氫氧化鈉物質量之比為1：2，氫氧化鈉濃度為1-4mol/L。

所述步驟B中鍺酸鈉溶液、硝酸鋅、硝酸鎵和硝酸鉻比例為0.4：1.4：1.2：0.0075，在20-60℃下充分混合。

所述步驟C中使反應體系pH在5-10之間。

所述步驟D中反應溫度為220℃，反應時間為4-6小時。

所述步驟E中時間分辨熒光的納米粒子的熒光壽命在1-100 ms之間，激發波長為250-550nm，發射波長為600-800 nm。

所述步驟F中嗎琳乙磺酸、氫氧化鈉混合液調節至pH=6-8，攪拌時間為12-48小時。

所述步驟G中時間分辨熒光的納米粒子濃度為0.1-1 mg/mL，MnO₂納米片濃度為10-200 μmol/L。