[發(fā)明專利]一種維持載藥紅細(xì)胞生物活性同時提高其載藥量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811559344.0
• 申請日: 2018-12-19
• 公開（公告）號: CN109730975B
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蘇靖;邱明豐;袁偉恩;張秀梅;郭朋程;徐恩格;吳欣怡;劉思雨
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K47/46
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 31219
• 代理人: 許亦琳;余明偉

本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種維持載藥紅細(xì)胞生物活性同時提高載藥量的方法。所述方法至少包括以下步驟：向低滲葡聚糖藥液中加入紅細(xì)胞，第一次孵育；加入高滲液，第二次孵育，使低滲葡聚糖藥液中的目的藥物包封于紅細(xì)胞中，離心洗滌除去葡聚糖，得到載藥紅細(xì)胞。采用本發(fā)明提供的方法簡便，高效，效果好，最后制得的載藥紅細(xì)胞的各類生物活性指標(biāo)與天然紅細(xì)胞沒有顯著性差異，很好地達(dá)到了維持載藥紅細(xì)胞體外生物活性的目的；在維持生物活性的同時，本發(fā)明提供的方法還能提高藥物的包載量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于藥物制劑領(lǐng)域，具體涉及一種維持載藥紅細(xì)胞生物活性同時提高其載藥量的方法。

背景技術(shù)

紅細(xì)胞(RBC)是人體最豐富的細(xì)胞類型，約占總細(xì)胞數(shù)四分之一，成熟紅細(xì)胞內(nèi)不含有細(xì)胞器、核酸等物質(zhì)，內(nèi)容物成分簡單。紅細(xì)胞在體內(nèi)循環(huán)時間長，其中人RBC成熟后進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)可存活100-120天，大鼠紅細(xì)胞可存活50-60天。基于紅細(xì)胞的上述特點(diǎn)，即來源豐富、良好的生物相容性、良好的生物可降解性、不誘導(dǎo)免疫反應(yīng)、體內(nèi)循環(huán)時間長等，從上世紀(jì)60-70年代開始，紅細(xì)胞就被廣泛用于各類物質(zhì)的包載，包括酶類、核酸以及各種小分子藥物。然而當(dāng)完成體外載藥過程的紅細(xì)胞重新進(jìn)入體內(nèi)循環(huán)時，壽命往往只有天然紅細(xì)胞的1/3甚至更短，目前尚沒有解決上述問題的辦法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種維持載藥紅細(xì)胞生物活性同時提高其載藥量的方法，可以最大程度地保護(hù)紅細(xì)胞免受體外各種不利因素的影響而降低生物活性，同時還可以提高載藥量。為了實(shí)現(xiàn)上述目的以及其他相關(guān)目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

本發(fā)明的第一方面，提供一種維持載藥紅細(xì)胞生物活性同時提高其載藥量的方法，至少包括以下步驟：

(1)向低滲葡聚糖藥液中加入紅細(xì)胞，第一次孵育；

(2)向步驟(1)中孵育后的混合物中加入高滲液，第二次孵育，使低滲葡聚糖藥液中的目的藥物包封于紅細(xì)胞中，離心洗滌除去葡聚糖，得到載藥紅細(xì)胞。

步驟(1)中，所述低滲葡聚糖藥液是指，含有葡聚糖、氯化鈉和需要負(fù)載于紅細(xì)胞上的目的藥物的低滲水溶液。

所述葡聚糖具有水溶性。可選的，所述葡聚糖的水溶性良好。

所述葡聚糖的分子量為10000-70000。

在一種實(shí)施方式中，所述低滲葡聚糖藥液中，以所述低滲葡聚糖藥液總量為基準(zhǔn)計，所述葡聚糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％-20％。

在一種實(shí)施方式中，以所述低滲葡聚糖藥液總量為基準(zhǔn)計，所述低滲葡聚糖藥液的組成成分包括：

目的藥物1mg/mL-10mg/mL，

質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.4％-0.6％的氯化鈉，

質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％-20％的葡聚糖，

溶劑為水。

在一種實(shí)施方式中，所述目的藥物選自倍他米松磷酸鈉、地塞米松磷酸鈉、鹽酸阿霉素、青蒿琥酯鈉、鹽酸嗎啡和牛血清白蛋白。

在一種實(shí)施方式中，步驟(1)中，所述紅細(xì)胞與低滲葡聚

糖藥液的體積比為1:(4-20)。

在一種實(shí)施方式中，步驟(1)中，所述紅細(xì)胞為壓積紅細(xì)胞。

進(jìn)一步的，所述壓積紅細(xì)胞的制備方法至少包括以下步驟：動物全血離心分離，去除血漿和白細(xì)胞，洗滌后得到所述壓積紅細(xì)胞。

動物全血離心條件為：4℃，3800r/min。

所述動物為哺乳動物，可以為嚙齒類動物、靈長類動物。例如可以為猴，兔，山羊，大鼠。