[發明專利]一種磁性微球吸附劑的制備方法及分離脂肪氧合酶的方法

有效

• 申請號: 201811559199.6
• 申請日: 2018-12-19
• 公開（公告）號: CN109589940B
• 公開（公告）日: 2019-09-20
• 發明（設計）人: 王國珍;周超一;丁語晨;金偉平;丁文平;王月慧
• 申請（專利權）人: 武漢輕工大學
• 主分類號: B01J20/24
• 分類號: B01J20/24;B01J20/30;A23L29/00
• 代理公司: 深圳市世紀恒程知識產權代理事務所 44287
• 代理人: 胡海國

1.一種分離脂肪氧合酶的方法，用于分離糙米米粉中的脂肪氧合酶，其特征在于，包括以下步驟：

向濕法制粉得到的糙米米漿中加入甲殼素基磁性微球吸附劑，在20～30℃、100～200rpm下攪拌2～6h，然后回收所述甲殼素基磁性微球吸附劑，得到脫除脂肪氧合酶后的糙米米粉，其中，所述甲殼素基磁性微球吸附劑通過以下步驟制得：

步驟S10、將純化后的甲殼素粉末分散于氫氧化鈉、尿素和水的混合液中，經過冷凍后再解凍，得到透明的甲殼素溶液；

步驟S20、向所述甲殼素溶液中加入異辛烷與司班85的混合物，攪拌后再加入吐溫85繼續攪拌，至得到形成有固體微球的混合溶液；

步驟S30、將所述混合溶液加熱至使其中的固體微球凝固后，調節所述混合溶液的pH值至呈中性，然后從所述混合液中分離出所述固體微球并進行清洗，得到甲殼素微球；

步驟S40、向氯化亞鐵的水溶液中加入所述甲殼素微球后，再加入雙氧水溶液，在隔絕氧氣環境下攪拌制得甲殼素基磁性微球吸附劑。

2.如權利要求1所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步驟S10中：所述混合液中的所述甲殼素、所述氫氧化鈉、尿素和水的質量分數對應為4～8％、8～14％、2～6％和72～86％。

3.如權利要求1或2所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步驟S10具體包括：

將純化后的甲殼素粉末分散于氫氧化鈉、尿素和水的混合液中，于-60～-30℃溫度下冷凍4～8h，然后在20～25℃溫度下攪拌解凍后，重復冷凍-解凍循環一次，形成溶解液，再將所述溶解液于-2～0℃、6000～9600rpm條件下離心15～90min，得到透明的甲殼素溶液。

4.如權利要求1所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步驟S20中：每100g所述甲殼素溶液中對應加入所述異辛烷、所述司班85和所述吐溫85的質量依次為200～500g、0.5～2.5g和4～6g。

5.如權利要求1或4所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步驟S20具體包括：

將異辛烷和司班85加入容器中進行第一次攪拌；待所述第一次攪拌完成后，將所述甲殼素溶液滴加入所述容器中，再進行第二次攪拌；待所述第二次攪拌完成后，再向所述容器中加入吐溫85，進行第三次攪拌至得到形成有固體微球的混合溶液。

6.如權利要求5所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，

所述第一次攪拌、第二次攪拌和第三次攪拌的攪拌轉速相同，且攪拌轉速為400～1300rpm，所述第一次攪拌的攪拌時間為30～90min，所述第二次攪拌和所述第三次攪拌的攪拌時間為1～4h；

所述第一次攪拌、第二次攪拌和第三次攪拌均在冰水浴中進行。

7.如權利要求1所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步驟S30具體包括：

步驟S31、將所述混合溶液在60～100℃下加熱5～10min，以使所述混合溶液中的固體微球凝固，然后使用稀鹽酸調節所述混合溶液的pH值至呈中性后，再從所述混合溶液中分離出得到固體微球；

步驟S32、將所述固體微球使用水和乙醇清洗后進行干燥處理，得甲殼素微球。

8.如權利要求1所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步驟S40具體包括：

向氯化亞鐵的水溶液中加入所述甲殼素微球，形成懸濁液，然后將所述懸濁液在20～25℃、N₂保護下攪拌0.5～2h后，再加入雙氧水溶液繼續攪拌3～15min，得甲殼素基磁性微球吸附劑。

9.如權利要求8所述的分離脂肪氧合酶的方法，其特征在于，步驟S40中：

所述氯化亞鐵水溶液中氯化亞鐵的摩爾濃度為100～300mmol/L；

所述懸濁液中甲殼素微球的質量分數為0.1～0.5％；

所述雙氧水溶液的質量濃度為3～30％。