[發明專利]一種制備去氫甲基睪丸素的方法

有效

• 申請號: 201811550158.0
• 申請日: 2018-12-18
• 公開（公告）號: CN109369760B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 左前進;吳來喜;羊向新
• 申請（專利權）人: 湖南科瑞生物制藥股份有限公司
• 主分類號: C07J1/00
• 分類號: C07J1/00
• 代理公司: 長沙歐諾專利代理事務所(普通合伙) 43234
• 代理人: 歐穎

1.一種制備去氫甲基睪丸素的方法，其特征在于，所述方法包括先采用營養培養基和一種或多種微生物菌種使得植物甾醇經微生物發酵后制備得到1，4-雄二烯二酮即IDD，再以所述IDD為原料，在甲基鹵化鎂、有機溶劑和酸存在下，在17位引入α-CH₃和β-OH，制備得到所述去氫甲基睪丸素；

其中，格氏試劑甲基鹵化鎂的制備步驟和由IDD制備去氫甲基睪丸素的步驟為：

加入35g鎂粉、800ml四氫呋喃，攪拌，保溫于30-35℃通入98g氯甲烷，通完后，繼續攪拌反應4～6小時，直至鎂粉基本消失，得格氏試劑甲基氯化鎂備用；加入100gIDD，500mlTHF，攪拌升溫至50～55℃，慢慢滴加800ml上述格氏試劑甲基氯化鎂溶液，1-1.5小時滴完，再繼續保溫攪拌反應2～3小時，TLC檢測反應終點，反應完后，慢慢滴加2N鹽酸至pH2-3，滴完后于50～55℃繼續水解反應2-3小時；

或者是加入35g鎂粉、800ml四氫呋喃，攪拌，保溫于40-45℃通入120g溴甲烷，通完后，繼續攪拌反應2～3小時，直至鎂粉基本消失，得格氏試劑甲基溴化鎂備用；加入100gIDD，500ml甲苯，攪拌升溫至50～55℃，慢慢滴加800ml上述格氏試劑甲基溴化鎂溶液，1-1.5小時滴完，再繼續保溫攪拌反應2～3小時，TLC檢測反應終點，反應完后，慢慢滴加2N鹽酸至pH2-3，滴完后于50～55℃繼續水解反應2-3小時；

或者是加入35g鎂粉、800ml乙醚，攪拌，保溫于30-35℃滴加150g碘甲烷，通完后，繼續攪拌反應4～6小時，直至鎂粉基本消失，得格氏試劑甲基碘化鎂備用；加入100gIDD，500ml苯，攪拌升溫至50～55℃，慢慢滴加800ml上述格氏試劑甲基碘化鎂溶液，約1-1.5小時滴完，再繼續保溫攪拌反應2～3小時，TLC檢測反應終點，反應完后，慢慢滴加2N鹽酸至pH2-3，滴完后于50～55℃繼續水解反應2-3小時。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，反應過程中包括先向有機溶劑和IDD中添加甲基鹵化鎂發生格氏加成反應，再添加酸將格氏加成反應得到的格氏物水解，然后減壓回收有機溶劑和加水進行水析后得到所述去氫甲基睪丸素。

3.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述營養培養基中包含葡萄糖、玉米漿、無機鹽、酵母膏、牛肉膏和蛋白胨中的一種或多種。

4.根據權利要求1所述方法，其特征在于，所述微生物菌種為包括分枝桿菌屬、鐮孢屬和解淀粉芽孢桿菌中的一種或多種。