[發明專利]一種煙葉中蘇糖酸和蘇糖酸酯的GC-MS分析方法

有效

• 申請號: 201811545364.2
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN110487922B
• 公開（公告）日: 2022-09-27
• 發明（設計）人: 劉鴻;李小蘭;吳晶晶;陳峰;王冰;黃善松;周蕓;王曉瑜;余晶晶;張曉兵;范忠
• 申請（專利權）人: 廣西中煙工業有限責任公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/14
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 李紅團

1.一種煙葉中蘇糖酸和蘇糖酸內酯的GC-MS分析方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)煙葉的粉碎：將煙絲或調制煙葉過的煙葉粉碎至40～60目，放于-20℃冰箱保存；

(2)煙葉中蘇糖酸及蘇糖酸內酯的萃取：稱取粉碎后的煙葉于離心管中，加入二氯甲烷渦旋萃取后，取二氯甲烷萃取液備用；取一定量二氯甲烷萃取液過濾后，風干，再加入含內標的水，萃取，取水萃取液備用；

(3)硅烷化衍生反應：取水萃取液過水相濾膜后，用氮吹儀吹干；取二氯甲烷萃取液過有機相濾膜后，直接與水萃取液吹干樣品合并；加入雙三氟乙酰胺衍生試劑衍生化反應后，然后進行GC-MS/MS儀器檢測；

(4)檢測：采用GC-MS進行檢測分析；

其中步驟(2)中煙葉中蘇糖酸及蘇糖酸內酯的萃取條件為：稱量0.5～1g粉碎后的煙葉于16ml離心管中，加入含內標氘代十六烷酸50μg/mL的5～10mL二氯甲烷，渦旋萃取15～30min，取二氯甲烷萃取液備用；取1～2mL樣本過濾后，風干，再加入含內標氘代十六烷酸50μg/mL的5～10mL水，渦旋萃取15～30min，取水萃取液備用；

其中步驟(3)中所述的硅烷化衍生反應條件為：取水萃取液過水相濾膜后，取0.5mL，用氮吹儀吹干；取二氯甲烷萃取液過有機相濾膜，取0.5mL直接與水萃取液吹干樣品合并；加入雙三氟乙酰胺衍生試劑50～150μL于60℃下衍生化反應10～40min，然后進行GC-MS/MS儀器檢測；

其中步驟(4)中所述的GC-MS色譜條件為：

進樣口溫度：280℃；進樣量：1.0μL；分流比10:1；載氣：氦氣，恒流流速1.0mL/min；色譜柱：DB-5MS色譜柱，60m×0.25mm i.d.×0.25μm d.f.；程序升溫：60℃保持2min，然后以3℃/min的速率升至150℃，再以5℃/min的速率升至200℃，最后以30℃/min的速率升至280℃，保持20min；

電離方式：EI；傳輸線溫度：280℃；離子源溫度：300℃。

2.根據權利要求1所述的煙葉中蘇糖酸和蘇糖酸內酯的GC-MS分析方法，其特征在于，GC-MS檢測分析中掃描方式可以采用全掃描模式或SIM掃描模式。

3.根據權利要求2所述的煙葉中蘇糖酸和蘇糖酸內酯的GC-MS分析方法，其特征在于，所述全掃描模式采集質量數范圍：40-500；SIM模式中，蘇糖酸內酯：定量離子247，定性離子147，73，217；蘇糖酸：定量離子292，定性離子220，205，147。