[發明專利]一種采用玉米干種子快速檢測粒腐病抗性的方法

在審

• 申請號: 201811545294.0
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN109504736A
• 公開（公告）日: 2019-03-22
• 發明（設計）人: 謝宗宜
• 申請（專利權）人: 靖西市秀美邊城農業科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18;C12R1/77;C12R1/80;C12R1/66;C12R1/645
• 代理公司: 北京天奇智新知識產權代理有限公司 11340
• 代理人: 牙斐穎

1.一種采用玉米干種子快速檢測粒腐病抗性的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

(1)玉米粒接種前準備：選擇干凈、健康的玉米易感品種干種子，清洗干凈，干種子用醋酸青鮮素溶液浸泡，干種子基部尖端去掉，露出種臍，于4℃～8℃冰箱存放，待接種用；

(2)制備粒腐病孢子懸浮液：從田間選取粒腐病嚴重的玉米果穗，用無菌水浸泡10min；反復用蒸餾水洗脫3次，每次洗脫蒸餾水用量50ml，浸泡液和洗脫液混合后，以6500～7000rap/min轉速離心20min，去除離心管內上清液，保留底部沉淀，重復離心3次，直至洗脫液全部被離心；最后收集離心管底部沉淀，靜置，用無菌水配成孢子懸浮液；

(3)接種玉米粒：將玉米粒基部朝下，豎直放置于含孢子懸浮液和玉米芯的濾紙培養皿中，種臍與孢子懸浮液相觸；

(4)發病培養：將步驟(3)中的濾紙培養皿放置于人工培養箱中培養，人工氣候培養箱溫度為25℃～28℃，濕度為75％～95％。

2.根據權利要求1所述方法，其特征在于，步驟(1)所述醋酸青鮮素溶液，醋酸濃度為2mol/L～8mol/L，青鮮素濃度為10mg/L～25mg/L，浸泡種子的溫度和時間分別為25℃～28℃、6～16h。

3.根據權利要求1所述方法，其特征在于，步驟(2)所述配置的孢子懸浮液中真菌活菌數濃度為：5×10⁴～8×10⁴個/ml。

4.根據權利要求1所述方法，其特征在于，步驟(3)所述內含孢子懸浮液和玉米芯的濾紙培養皿制備方法為：將無菌濾紙放置在培養皿中，再倒入孢子懸浮液，孢子懸浮液以淹沒濾紙為準，再將玉米芯均勻灑在濾紙上。

5.根據權利要求1或4所述方法，其特征在于，步驟(3)所述內含孢子懸浮液和玉米芯的濾紙培養皿，孢子懸浮液和玉米芯比例為：2ml：2.5g。

6.根據權利要求1所述方法，其特征在于，步驟(4)所述濾紙培養皿在人工氣候培養箱中培養時間為10～15d。