[發明專利]一株赤紅球菌及其作為免疫佐劑在制備疫苗中的應用

有效

• 申請號: 201811540974.3
• 申請日: 2018-12-17
• 公開（公告）號: CN109576180B
• 公開（公告）日: 2021-11-26
• 發明（設計）人: 詹少春;孫超;廖想
• 申請（專利權）人: 北京利昂盛生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K39/39;A61P37/04;C12R1/01
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君;陳征

本發明公開了一株赤紅球菌及其作為免疫佐劑在制備疫苗中的應用。本發明的赤紅球菌也稱為紅色紅球菌(Rhodococcus ruber)RDC?01，保藏編號為CGMCC NO.16640，該菌具有提高調節機體免疫的功能，可非特異增強TB淋巴細胞、巨噬細胞，NK細胞的活性，誘生干擾素等多種細胞因子，將該菌滅活后作為免疫佐劑添加入油乳劑滅活疫苗中可以明顯促進疫苗誘導動物抗體產生，與單獨使用油乳劑滅活疫苗相比，能夠產生高滴度的抗體，使用安全，無短期及長期的毒副作用，在動物用疫苗制備領域應用前景良好。

技術領域

本發明屬于微生物學與免疫學領域，具體地說，涉及一種赤紅球菌及其作為免疫佐劑在制備疫苗中的應用。

背景技術

禽用各類傳染病的滅活疫苗，對防控這些疫病發揮了重要作用。使用滅活疫苗希望能夠達到消除性免疫，即在接受某種疫苗免疫后，完全保護機體受此類疫病的感染發病，或者在感染后不排毒，不將病毒傳播給其它動物。但現有滅活疫苗免疫機體后抗體產生較慢，抗體持續期較短，抗體水平整齊度差。為了使抗體水平整齊度較好，一方面，一般需要多次免疫，維持較高的抗體水平；另一方面，禽用滅活疫苗在配制時需要進行抗原濃縮，以保證疫苗中的抗原含量和疫苗的免疫效果。這些措施都增加了疫苗的生產成本，因此，研究開發安全、高效、經濟的禽用油乳劑滅活疫苗專用免疫佐劑成為研究熱點。

免疫佐劑就是指先于抗原或與抗原同時應用，能非特異性地改變或增強機體對該抗原的特異性免疫應答，能增強相應抗原的免疫原性或改變免疫反應類型，而本身無抗原性的物質，又稱免疫佐劑或抗原佐劑。常用的免疫佐劑有滅活的分岐桿菌(如卡介苗和結核桿菌等)、細胞因子、雙鏈聚肌苷酸、鋁膠佐劑及礦物油佐劑等。目前免疫佐劑普遍存在以下問題：(1)滅活的結核桿菌佐劑，由于自然的結核分岐桿菌具有高毒力，對人和動物有致病性。目前都是采用減毒的卡介苗制備佐劑，但是仍然存在后續處理要求高，容易造成滅活不徹底導致作為佐劑應用是引發高度的動物健康危險性，此外在注射部位會引起強烈的炎癥和潰瘍，使用受到限制。(2)細胞因子具有調整和重建免疫應答的能力，但價格較為昂貴，不適用于動物疫苗。(3)雙鏈聚肌苷酸(聚肌胞)是一種人工合成的雙鏈核糖核酸，是一種干擾素誘導劑，有抗病毒和免疫調節功能，但是鑒于其半衰期短，體內呈一過性反應，其作為禽用油乳劑滅活疫苗免疫佐劑的效用仍不明確。(4)鋁膠佐劑是目前動物疫苗常用佐劑，其主要問題是：①主要激活Th2型免疫細胞，只誘導體液免疫應答，適用于以抗體保護為主的疾病疫苗；②鋁膠佐劑在注射部位緩慢釋放抗原的效應較低，對很多抗原效果不確實。

綜上所述，目前常用的疫苗佐劑，由于局部刺激強烈、誘導免疫應答差等諸多缺點，限制了其應用。因此，開發新一代高效、低毒、廉價的疫苗佐劑用于改善動物免疫效果變得十分迫切，成為畜禽養殖業亟待解決的重要問題。

赤紅球菌(Rhodococcus rubber)是降解苯酚的專性菌，對原油中苯酚、烴類及芳烴類化合物具有較高的降解作用，現有技術常利用赤紅球菌的特性降解廢水中的有機污染物，促進污染環境的改善，保護生態環境。赤紅球菌在除了環境治污方面的應用有廣泛的報道外，未有其他應用的相關報道。

發明內容

本發明的目的是提供一種具有調節機體免疫功能，高免疫刺激力的赤紅球菌在作為免疫佐劑方面的用途。

為了實現本發明的目的，本發明的赤紅球菌(Rhodococcus rubber)RDC-01是從廣州市番禺區附近郊野紅土中篩選到的。經16S rRNA基因序列分析和培養特性鑒定，該菌株為赤紅球菌也稱為紅色紅球菌。該菌株已于2018年10月30日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101)，分類命名為赤紅球菌(Rhodococcus rubber)，保藏號為CGMCCNo.16640。