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[發明專利]一株赤紅球菌及其作為免疫佐劑在制備疫苗中的應用有效

專利信息
申請號: 201811540974.3 申請日: 2018-12-17
公開(公告)號: CN109576180B 公開(公告)日: 2021-11-26
發明(設計)人: 詹少春;孫超;廖想 申請(專利權)人: 北京利昂盛生物技術有限公司
主分類號: C12N1/20 分類號: C12N1/20;A61K39/39;A61P37/04;C12R1/01
代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 代理人: 王文君;陳征
地址: 100085 北京*** 國省代碼: 北京;11
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摘要:
搜索關鍵詞: 赤紅 球菌 及其 作為 免疫佐劑 制備 疫苗 中的 應用
【權利要求書】:

1.一株赤紅球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01,其保藏編號為CGMCC NO.16640。

2.含有權利要求1所述的赤紅球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01的菌劑。

3.含有權利要求1所述的赤紅球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01的組合物。

4.如權利要求3所述的組合物,其特征在于,其為免疫佐劑、保健品或疫苗。

5.如權利要求4所述的組合物,其特征在于,所述疫苗為動物用油乳劑疫苗。

6.如權利要求3-5任一所述的組合物,其特征在于,赤紅球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01在疫苗中的菌體干重濃度為0.025-0.75mg/mL。

7.權利要求1所述的赤紅球菌在制備巨噬細胞誘導刺激劑中的應用。

8.一種將赤紅球菌制作為免疫佐劑的方法,包括以下步驟:

(1)將保藏編號為CGMCC NO.16640的赤紅球菌RDC-01活化后接種至搖瓶培養基中,30~37℃振蕩培養至對數生長后期,收集搖瓶菌種;

(2)將搖瓶菌種接種至種子培養基中,30~37℃培養至對數生長期,得種子液;所述種子培養基為:蛋白胨15g/L,酵母粉15g/L,NaCl 10g/L,葡萄糖15g/L,NH4SO4 2g/L,pH7.0-7.5;

(3)將所述種子液接種至發酵培養基中,30~37℃發酵完成后,離心收集沉淀,用生理鹽水或注射用水沖洗沉淀三次后,離心收集沉淀;發酵培養基同種子培養基;

(4)將步驟(3)中收集的沉淀高壓滅菌,即得。

9.根據權利要求8所述的方法,其特征在于,步驟(2)中,培養溫度為30℃,培養基的pH為7.3;

步驟(3)中,培養溫度為30℃。

10.一種動物用油乳劑滅活疫苗的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:

(1)佐劑液的制備:取權利要求1所述的赤紅球菌(Rhodococcus ruber)RDC-01高壓滅菌處理后,溶于無菌生理鹽水中制備成菌體干重濃度為10-100mg/mL的佐劑液;

(2)抗原水相的制備:取80-98體積份的滅菌抗原,無菌條件下添加1-10體積份的佐劑液,再加入2-8體積份滅菌的吐溫80,至吐溫80完全溶解后得到抗原水相;所述抗原水相中赤紅球菌的濃度為0.1-1.0mg/mL;

(3)疫苗的制備:抗原水相與滅菌油相的體積比為1:1.5-1:3混合進行乳化,制備得到油乳劑滅活疫苗。

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