[發明專利]基于谷胱甘肽功能化的金納米團簇探針檢測三聚氰胺濃度的方法

有效

• 申請號: 201811534116.8
• 申請日: 2018-12-14
• 公開（公告）號: CN109324029B
• 公開（公告）日: 2021-08-06
• 發明（設計）人: 馮大千;劉國良;張婷婷;王蓉
• 申請（專利權）人: 鹽城工學院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 南京業騰知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32321
• 代理人: 李靜

本發明公開了一種基于發光金納米團簇檢測三聚氰胺的方法，該方法主要體現在利用金納米團簇測定待測樣品中三聚氰胺含量，具體包括以下步驟：(a1)將三聚氰胺標準品或待測樣品與金納米團簇探針混合，分別測定其熒光強度，得到混合前后體系熒光強度的變化值；(a2)根據所述三聚氰胺標準品的混合溶液的反應前后熒光強度的變化值繪制標準曲線，將所述待測實際樣品混合前后體系的熒光強度變化值代入所述標準曲線，從而得到所述待測實際樣品中三聚氰胺的含量。本發明檢測成本低、檢測速度快，能夠快速實時檢測牛奶中三聚氰胺的含量，同時具有高靈敏度、簡便、易行等特點。

技術領域

本發明屬于化工領域，具體涉及基于水溶性發光納米金簇的熒光生物傳感器快速、靈敏檢測三聚氰胺的新方法。

背景技術

三聚氰胺是一種三嗪類含氮雜環有機化合物化工原料，俗稱蛋白精，不能添加到食品或者用于食品加工或食品添加物。然而，它作為一種富氮的有機化合物，近年來被很多不法分子非法的添加到了乳制品和飼料中，以虛增產品蛋白質的含量。常規檢測方法是凱氏定氮法，通過測定氮含量來確定蛋白質含量，不對氮的來源加以辨別。非法添加三聚氰胺對公眾健康的危害、對食品行業發展的不良影響，迫切需求具有高靈敏度的三聚氰胺檢測方法。

對三聚氰胺的定量測定有利于食品安全監測，傳統的三聚氰胺檢測方法包括高效液相色譜法、氣相色譜-質譜聯用法、電位滴定法、酶聯免疫吸附分析法等[參見：Pei X.F.,TandonA.,AlldrickA.,Giorgi L.,Huang W.,Yang R.J.,Food Policy.2011,36,412-420.]，上述方法一般需要專業的操作人員，且存在選擇性低或者精確度不高的不足，難以滿足實際食品監管中快速、高效、低成本的檢測要求。近年發展的新方法，如納米材料比色法、分子印跡聚合物法、熒光探針法和表面增強拉曼散射技術等[參見：Tittlemier S.A.,FoodAddit ContamA.2010,27,129-145.]，與傳統方法相比，具有檢出限低、靈敏度高的優勢，但是操作繁瑣、檢測時間長，需要衍生或者昂貴的儀器。因此，尋找新的高靈敏、低成本、簡便、快速的光譜檢測新方法具有重要的研究意義。

發明內容

本發明是針對現有技術存在的不足，提供一種基于谷胱甘肽功能化的金納米團簇探針檢測三聚氰胺濃度的方法，具體為一種利用水溶性發光金納米團簇的新用途，還保護水溶性發光金納米團簇在測定實際樣品中三聚氰胺含量中的應用，滿足實際使用要求。

為解決上述問題，本發明所采取的技術方案如下：

本發明所提供的利用谷胱甘肽功能化的發光金納米團簇生物傳感器測定待測樣品中三聚氰胺含量的方法，包括如下步驟：

步驟(a1)：將三聚氰胺標準品或待測樣品與金納米團簇探針混合，同時設置與所述混合溶液相比不加三聚氰胺標準品或所述待測實際樣品的空白體系，將所述實驗混合溶液和所述空白體系在同一條件下進行測試，分別測定其熒光強度，計算所得所述實驗混合溶液和所述空白體系的熒光強度差值；

步驟(a2)：根據步驟(a1)得到的所述三聚氰胺標準品的所述熒光強度差值繪制標準曲線，將所述待測實際樣品的所述熒光強度差值代入所述標準曲線，從而得到所述待測實際樣品中三聚氰胺的含量。

在上述方法中，步驟(a2)中，所述根據步驟(a1)得到的所述三聚氰胺標準品的熒光強度差值繪制標準曲線，是以加入所述三聚氰胺標準品前后探針的熒光強度差值除以空白反應體系的熒光強度為縱坐標，以所述三聚氰胺標準品的濃度為縱坐標，繪制標準曲線。

在上述方法中，所述實驗混合溶液和所述空白體系的熒光強度差值為加入三聚氰胺反應后熒光強度減去所述空白體系的熒光強度。