[發明專利]肝癌早期診斷方法和診斷試劑盒

在審

• 申請號: 201811534109.8
• 申請日: 2018-12-14
• 公開（公告）號: CN109557312A
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: 蔣健;李昊;蒲玨
• 申請（專利權）人: 北京艾克倫醫療科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 北京慧誠智道知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11539
• 代理人: 李楠

本發明提供了一種在受試者中進行肝癌早期診斷的方法，其包括：1)從所述受試者獲得生物樣品；2)檢測所述生物樣品中多個生物標志物的含量，所述多個生物標志物選自AFP、AFP?L3、GP73、Fuc?GP73、DCP、CEA、CA19?9、TK1、DKK1、γ?GT、ALP、AFU、ALT、以及Fuc?Kininogen 1中的兩個或兩個以上；3)基于步驟2)的檢測結果計算所述受試者患有肝癌的概率；4)將所述概率與設定閾值進行比較，其中當所述概率大于等于設定閾值時，則認為所述受試者患有肝癌；當所述概率小于設定閾值時，則認為所述受試者不患有肝癌。本發明還提供了相應的檢測試劑盒和檢測設備。本發明采用多種標志物的聯合檢測來提高肝癌早期診斷的靈敏度、特異性，為肝癌的臨床診斷提供更加可靠的依據。

技術領域

本發明涉及肝癌早期診斷的方法，尤其是多蛋白標志物聯合的肝癌診斷方法。本發明還涉及用于肝癌早期診斷的試劑盒和設備。

背景技術

肝細胞癌HCC(hepatocellular carcinoma)是臨床上常見的惡性腫瘤之一，其主要的病因學是HCV或HBV慢性肝病毒感染。目前，中國有癥狀的慢性乙型肝炎病人約為2000萬人，其中近25％至30％慢性乙肝病人可發展為肝硬化。由于眾多的肝病患者和肝癌高危人群，中國肝癌發病率高居全球之首。2015年世衛組織報告指出，肝癌全球有78.2萬新發病例，74.5萬死亡病例。其中，中國的新發病例數及死亡病例數均占了約50％。

臨床治療發現，即使行根治性切除術術后5年內仍有超過50％的患者出現復發轉移。一旦出現復發轉移，患者的近期隨訪存活率極低。由于肝癌早期癥狀及體征不明顯，待發現時大部分患者已經為中晚期，錯過了最佳治療時機，而早期確診、早期治療能夠有效延長患者的生存期。所以在高危人群中建立早期診斷和監測機制是非常重要的。

腫瘤標志物(tumor markers，TM)作為一項重要指標，在腫瘤的早期診斷中發揮著越來越重要的作用。TM是指在腫瘤發生和增殖過程中，由腫瘤細胞本身合成、釋放，或由機體對腫瘤細胞反應而產生的標志腫瘤存在和生長的一類物質。這些物質在正常成人中不存在或者是在癌癥患者中出現的水平顯著高于正常人。目前腫瘤標志物檢測技術被認為是早期發現無癥狀微灶腫瘤的唯一途徑，這一檢測技術可先于X光片、超聲、CT、MRI或PET-CT等物理檢查發現腫瘤，可用于高危人群惡性腫瘤的篩查，腫瘤診斷與鑒別診斷，評估治療的效果，預測或監視腫瘤復發或轉移。

目前針對肝癌早期診斷最常使用的腫瘤標志物是甲胎蛋白AFP，由于AFP具有與HCC的相對特異性，因此目前得到廣泛應用，但是部分良性肝病中AFP為陽性(特異性≤75％)和部分肝癌中AFP為陰性(靈敏度≤70％)，使得單一的依靠AFP進行HCC預警和監測具有一定的局限性，而且AFP檢測對于HCV相關的HCC靈敏度不高。

除了AFP，可用于肝癌診斷的標志物還有AFP異質體(AFP-L3)、高爾基跨膜蛋白(GP73)、高爾基體蛋白異質體(Fuc-GP73)、血清異常凝血酶原(DCP)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原19-9(CA19-9)、胸苷激酶1(TK1)、分泌型蛋白(Dikkopf-1，DKK1)、γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)、堿性磷酸酶(ALP)、α-L-巖藻糖苷酶(α-L-Fucosidase，AFU)、谷丙轉氨酶(ALT)、激肽原1異質體(Fuc-Kininogen 1)等，但各單項指標檢測診斷肝癌的靈敏度、特異性較低。

發明內容

為了克服上述問題，在一方面，本發明提供了一種在受試者中進行肝癌早期診斷的方法，其包括：

1)從所述受試者獲得生物樣品；

2)檢測所述生物樣品中多個生物標志物的含量，所述多個生物標志物選自AFP、AFP-L3、GP73、Fuc-GP73、DCP、CEA、CA19-9、TK1、DKK1、γ-GT、ALP、AFU、ALT、以及Fuc-Kininogen 1中的兩個或兩個以上；