[發明專利]源于巴馬長壽村的鼠李糖乳桿菌hsryfm 1301的標志引物對、鑒定方法及其應用有效
| 申請號: | 201811533437.6 | 申請日: | 2018-12-14 |
| 公開(公告)號: | CN109439778B | 公開(公告)日: | 2021-06-04 |
| 發明(設計)人: | 張臣臣;張玉律;顧瑞霞;陳大衛;伍云;黃玉軍;黃嘉棣;謝秉鏘;關成冉 | 申請(專利權)人: | 揚州大學;皇氏集團股份有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/689 | 分類號: | C12Q1/689;C12Q1/06;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/225 |
| 代理公司: | 揚州蘇中專利事務所(普通合伙) 32222 | 代理人: | 沈志海 |
| 地址: | 225009 *** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 源于 巴馬 長壽 鼠李糖乳 桿菌 hsryfm 1301 標志 引物 鑒定 方法 及其 應用 | ||
1.源于巴馬長壽村的鼠李糖乳桿菌hsryfm 1301的標志引物對,其特征是,所述引物對包括:
hsryfm 1301-1F:CTATTGACGAGCAAGCAGGATC,
hsryfm 1301-1R:TCAGCTGGTAGACGCGTGTGAA;
hsryfm 1301-2F:TTTTAAGAACTATATTCAGGAAGGC,
hsryfm 1301-2R:AAATACTAGCGACTTAAAACAGGAG;
hsryfm 1301-3F:ATGACCCACTCTCAGACTAACACC,
hsryfm 1301-3R:TAGGTCATTTTGAGGACTCCTTTCG;
hsryfm 1301-4F:AACCGTTTACACTTACTTTGCCATG,
hsryfm 1301-4R:CGCTGAAAACCCGCAATTTAC。
2.鼠李糖乳桿菌hsryfm 1301的鑒定方法,其特征是,所述鑒定方法為:
(1)提取待測樣本中的DNA;
(2)利用權利要求1所述的引物對,使用rTaq DNA聚合酶對待測樣本的DNA進行擴增,PCR產物利用1%瓊脂糖凝膠進行電泳;
(3)EB染色之后觀察:
如果hsryfm 1301-1F/R能夠從待測樣本DNA中擴增條帶大小為900bp,和hsryfm 1301-2F/R能夠從待測樣本DNA中擴增條帶大小為1100bp,和hsryfm 1301-3F/R能夠從待測樣本DNA中擴增條帶大小為1000bp,和hsryfm 1301-4F/R能夠從待測樣本DNA中擴增條帶大小為800bp,則證明樣本中含有鼠李糖乳桿菌hsryfm 1301。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征是,所述擴增條件見表1:
表1 4對引物的擴增條件和程序
4.根據權利要求2所述的方法,其特征是,所述電泳條件為:120V,300mA,30min。
5.權利要求2所述的鑒定方法在發酵制品中鼠李糖乳桿菌hsryfm 1301存在驗證中的應用。
6.權利要求2所述的鑒定方法在糞便中鼠李糖乳桿菌hsryfm 1301存在驗證中的應用。
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