[發(fā)明專利]一種細菌性角膜炎動物模型及其構(gòu)建方法和應用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811527374.3 | 申請日： | 2018-12-13 |
| 公開（公告）號： | CN109820875A | 公開（公告）日： | 2019-05-31 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 孫曉東;朱鴻;黃海清;胡潔;汪楓樺;閆泉;翟元琦 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海市第一人民醫(yī)院 |
| 主分類號： | A61K35/74 | 分類號： | A61K35/74;A61K49/00 |
| 代理公司： | 上海漢聲知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236 | 代理人： | 莊文莉 |
| 地址： | 200080 *** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 構(gòu)建 動物模型 細菌感染性角膜炎 細菌性角膜炎 熒光標記基因 角膜感染 實驗小鼠 應用 綠膿桿菌感染 熒光成像系統(tǒng) 角膜內(nèi)皮層 角膜切口 角膜熒光 角膜組織 綠膿桿菌 平行切口 生物活體 實時定量 眼球角膜 致病機制 治療效果 攜帶 上皮層 滴加 觀察 活體 角膜 懸液 麻醉 復蘇 檢測 成功 研究 | ||
1.一種細菌性角膜炎動物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：
S1、在實驗小鼠的眼球角膜表面劃三條平行切口，深度為割破角膜上皮層但不超過角膜內(nèi)皮層，在角膜切口區(qū)域滴加1～10ul綠膿桿菌懸液，靜置后自然復蘇；
S2、將經(jīng)步驟S1處理后的實驗小鼠每日進行觀察角膜感染情況，并檢測角膜熒光情況。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌性角膜炎動物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S1中，所述實驗小鼠為無眼部疾患的雌性健康小鼠。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌性角膜炎動物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S1中，所述綠膿桿菌懸液中的細菌量為1×105CFU～1×106CFU。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述的細菌性角膜炎動物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，步驟S1中，所述綠膿桿菌懸液的制備方法如下：將攜帶熒光標記基因的綠膿桿菌菌株ATCC 19660，在腦心浸液肉湯中37℃搖晃孵育過夜，4000rpm離心后，加入PBS溶液重懸即得。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的細菌性角膜炎動物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述腦心浸液肉湯中含有濃度為10～100ug/ml的卡那霉素。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細菌性角膜炎動物模型的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟S2中，采用生物活體熒光成像系統(tǒng)檢測實驗小鼠角膜熒光情況，并對熒光圖像進行定量分析。
7.一種根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項所述方法構(gòu)建的細菌性角膜炎動物模型。
8.一種根據(jù)權(quán)利要求7所述的細菌性角膜炎動物模型在研究細菌性角膜炎中的應用。
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