[發(fā)明專利]一種細菌總數(shù)的快速檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811525024.3
• 申請日: 2018-12-13
• 公開（公告）號: CN109576339A
• 公開（公告）日: 2019-04-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李抄;陳盟;杜耀華;程智;李玲君;呂蒙
• 申請（專利權(quán)）人: 軍事科學(xué)院系統(tǒng)工程研究院衛(wèi)勤保障技術(shù)研究所
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 劉奇

1.一種細菌總數(shù)的快速檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)待測樣本液和體細胞ATP釋放劑混合反應(yīng)，得到除體細胞ATP溶液；

2)將所述除體細胞ATP溶液和ATP發(fā)光試劑混合反應(yīng)30～60s，得到除游離ATP溶液；

3)將所述除游離ATP溶液和細菌ATP釋放劑混合反應(yīng)，得到熒光反應(yīng)液；

4)熒光檢測儀檢測所述熒光反應(yīng)液，得到熒光數(shù)據(jù)；

5)將所述熒光數(shù)據(jù)代入公式a中計算，得到待測樣本液中細菌數(shù)量；

其中，Y表示檢測得到的熒光數(shù)據(jù)，X表示細菌數(shù)量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述快速檢測方法，其特征在于，所述體細胞ATP釋放劑的體積為待測樣本液體積的2～5倍；

所述ATP發(fā)光試劑的體積為待測樣本液體積的1～3倍；

所述細菌ATP釋放劑的體積為待測樣本液體積的2～5倍。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述，其特征在于，所述待測樣本液的制備方法根據(jù)待測樣本的形態(tài)的差異采用不同方法處理：

當待測樣本為固體時，用棉簽擦拭待檢測樣本的表面，將擦拭后的棉簽置于無菌純凈水中反復(fù)攪拌，得到固體待測樣品液；

當待測樣本為氣體時，用空氣采樣裝置采樣，得到氣體待檢測樣品液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任意一項所述快速檢測方法，其特征在于，所述快速檢測方法在熒光檢測系統(tǒng)中進行；

所述熒光檢測系統(tǒng)包括熒光檢測容器和熒光檢測裝置；所述熒光檢測容器為上部開口的圓柱形容器；所述熒光檢測容器選用透明的材質(zhì)；所述熒光檢測容器可拆卸固定在熒光檢測裝置的底面；

所述熒光檢測裝置在靠近底面的側(cè)壁上設(shè)置有探測器，用于檢測熒光信號；所述熒光檢測裝置在設(shè)置探測器的對面?zhèn)缺谏显O(shè)施有反射鏡，用于增強熒光信號；所述熒光檢測裝置的上部開口處設(shè)置蓋體；所述蓋體和側(cè)壁均選擇不透光的材質(zhì)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述快速檢測方法，其特征在于，步驟1)中所述待測樣本液和體細胞ATP釋放劑混合，步驟2)中所述將所述除體細胞ATP溶液和ATP發(fā)光試劑混合，步驟3)中將所述除游離ATP溶液和細菌ATP釋放劑混合反應(yīng)的操作均在所述熒光檢測容器中進行；所述熒光檢測容器為從熒光檢測容器中拆卸下來的狀態(tài)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述快速檢測方法，其特征在于，步驟4)中所述熒光檢測裝置檢測所述熒光反應(yīng)液的操作將所述熒光檢測容器置于所述熒光檢測裝置中進行檢測。