[發明專利]基于非線性化學指紋圖譜鑒別小米產地的方法

有效

• 申請號: 201811493119.1
• 申請日: 2018-12-11
• 公開（公告）號: CN109507247B
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發明（設計）人: 胡俊平
• 申請（專利權）人: 邯鄲學院
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N1/28
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.基于非線性化學指紋圖譜鑒別不同產地小米的方法，其特征在于，包括如下步驟：

A、建立前處理后的化學成分的非線性化學指紋圖譜：

Ⅰ、樣品前處理：

S1、將小米進行粉碎處理，并過80目篩，然后浸泡在溫度為50-65℃的水中，浸泡時間為120-160min，然后進行打漿處理，所得記為小米漿；

S2、向S1中所得的小米漿中加入質量為其0.3-0.7%的混合蛋白酶并調節pH為6.0-7.0然后置于超聲波細胞破碎儀中破碎處理4-8min后，調節水溫為48-50℃，保溫浸泡5-9h，所得記為混合組分A；

S3、向混合組分A中加入質量為其0.4-0.7%的復合淀粉酶，并調節混合組分的pH值為5.8-6.5，調節水溫為50-55℃，超聲分散4-8min后保溫浸泡25-40min；然后升溫至80-85℃，超聲分散5-10min后保溫浸泡30-50min，再將溫度升至95-100℃，保溫25-40min；

S4、將S3所得進行真空減壓排氣，然后再將混合組分B移入離心分離機中離心200-260s后再經過濾處理，棄去濾渣，所得濾液記為混合組分B；

Ⅱ、繪制前處理后的樣品的非線性化學指紋圖譜；

準確量取10mL混合組分B并移至微波水解石英杯中，然后向其中加入10mL濃度為4.0moL/L硫酸溶液，蓋好石英杯，并將石英杯放入密封裝置中，擰緊，插入溫度傳感器，抽真空，充入高純氮氣以保護樣品，重復3次；

在800W功率條件下，不同水解溫度下水解不同時間，當溫度冷卻至室溫后打開密封裝置，取出水解槽，將微波水解瓶逐一取下后，將水解液轉移至倒入帶有磁力攪拌器的恒溫水浴杯中，相繼加入12ml，0.080mol/L的硫酸錳溶液與5ml，1mol/L的丙酮溶液作為反應底液，并開啟磁力攪拌器，調節轉速為500r/min；

在另一個恒溫水浴杯中加入10ml濃度為0.4mol/L的溴酸鉀溶液，待在37℃的溫度下恒溫10min后，將溴酸鉀溶液倒入反應底液，并用電化學工作站記錄電壓-時間曲線，以繪制出前處理后的樣品的非線性化學指紋圖譜；

B、檢測樣品：

取待檢測的前處理后的樣品，使用與標準樣品相同的前處理條件，得出檢測樣品的圖譜，將兩者的指紋圖譜用直接觀察并且以Origin軟件分析作為定性依據；

C、重現性考察：

取待檢測的前處理后的樣品，測定其圖譜，測得的非線性化學指紋圖譜的各種特征參數的RSD＜3％，表明所述方法具有很好的重現性；

進一步，非線性化學指紋圖譜法包括如下步驟：

A-1、標準樣品選擇：

同一產地同一品牌的小米，以4-8個批次為標準樣品；

A-2、非線性化學指紋圖譜法分析條件：

檢測儀器：瑞士萬通204N型電化學工作站，HH-501型超級恒溫水浴鍋，85-2A型數顯恒溫磁力攪拌器，213型金屬鉑電極，217型甘汞電極；黑龍江肇東龍谷25、河北張家口桃花米、內蒙古赤峰小米、遼寧朝陽大金苗、山東章丘龍山米、陜西米脂小米、山西沁州黃小米七個不同產地的小米、10ml濃度為4.0mol/L硫酸溶液、12ml濃度為0.08mol/L的硫酸錳溶液、5ml濃度為1.0mol/L的丙酮溶液，10ml濃度為0.4mol/L的溴酸鉀溶液；

A-3、非線性化學指紋圖譜信息參數分析：

用Origin軟件繪制電壓-時間曲線，即獲得不同產地小米的非線性化學指紋圖譜以及其特征參數；

其中，圖譜參數包括：

誘導時間：從加入試劑到振蕩發生的時間；

振蕩壽命：振蕩開始到振蕩結束的時間；

最大振幅：振蕩過程中相鄰電位正峰和負峰之間的最大差值；

最高電位；振蕩曲線的電位最高值；

最低電位；振蕩曲線的電位最低值；

平衡電位；體系達到熱力學平衡時的電位；

測得的非線性化學指紋圖譜的各種特征參數的RSD＜3％；

B、檢測樣品：

取待檢測的前處理后的樣品，使用與標準樣品相同的條件檢測，得出檢測樣品的非線性化學指紋圖譜，將兩者的非線性化學指紋圖譜直接觀察并且以Origin軟件分析作為定性依據，如果兩者的圖譜系統的相似度大于97%，可認為是同一產地同一產品，若相似度小于97%，則認為不是同一地區同一產品；

C、重現性考察：

取6份待測前處理后的樣品，測定其圖譜并進行考察。