[發(fā)明專利]一種檢測外周血中子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞標(biāo)志物的試劑盒

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811488969.2
• 申請日: 2018-12-06
• 公開（公告）號: CN109371134B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚煥然;郭紅燕;牛剛;張坤
• 申請（專利權(quán)）人: 北京牛牛基因技術(shù)有限公司;北京大學(xué);北京大學(xué)第三醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/10;C12N15/11
• 代理公司: 北京北新智誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11100
• 代理人: 張晶;程鳳儒

1.一種檢測外周血中子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞標(biāo)志物的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒由如下組分組成：

結(jié)合有子宮內(nèi)膜癌抗體的磁珠；

結(jié)合有寡核苷酸Oligo(dT)的磁珠；

緩沖液A；100-200mL；

緩沖液B：100-200mL；

裂解/結(jié)合緩沖液 150-250mL；

10×緩沖液 4.0-5.0mL；

dNTPs，5mM each 4.0-5.0mL；

逆轉(zhuǎn)錄酶，10000U/μL 2.0-3.0mL；

RNA酶抑制劑，40 U/μL 0.4-0.6mL；

2×多重PCR混合液 2-3mL；

RNase-free水 1-2mL；

子宮內(nèi)膜癌腫瘤標(biāo)志物引物10μmol/L 3.0-5.0mL；

其中所述子宮內(nèi)膜癌腫瘤標(biāo)志物為ER、PAX8和P53；

所述ER引物序列為：

上游引物如SEQ ID NO：1所示；

下游引物如SEQ ID NO：2所示；

所述PAX8引物序列為：

上游引物如SEQ ID NO：3所示；

下游引物如SEQ ID NO：4所示；

所述P53引物序列為：

上游引物如SEQ ID NO：5所示；

下游引物如SEQ ID NO：6所示；

所述子宮內(nèi)膜癌抗體為抗EpCAM單克隆抗體、抗MUC1單克隆抗體和抗CK20單克隆抗體；

所述緩沖液A的配方為： 10mM Tris-HCl, pH7.5；0.15M LiCl；1mM EDTA；0.1% LiDS；

所述緩沖液B的配方為：10mM Tris-HCl, pH7.5；0.15M LiCl；1mM EDTA。

2.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述2×多重PCR混合液中包含HotStarTaqDNA Polymerase 5U/μL。

3.如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述裂解/結(jié)合緩沖液配方：100mM Tris-HCl, pH7.5；500mM LiCl；10mM EDTA, pH8；1% LiDS；5mM DTT。