[發明專利]一種基于VEGFR-2抑制劑索拉菲尼的光親合探針分子及其制備方法

在審

• 申請號: 201811482248.0
• 申請日: 2018-12-05
• 公開（公告）號: CN109456261A
• 公開（公告）日: 2019-03-12
• 發明（設計）人: 張杰;盧聞;王嗣岑;潘曉艷;賀浪沖;孫瑩;王瑾;宋杰
• 申請（專利權）人: 西安交通大學
• 主分類號: C07D213/79
• 分類號: C07D213/79;C07D213/803;C07D213/81;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 安彥彥

一種基于VEGFR?2抑制劑索拉菲尼的光親合探針分子及其制備方法，索拉菲尼在NaOH堿性條件下酰胺鍵水解得到帶有單羧酸的中間產物；含有光親和基團雙吖丙啶與炔基的鏈接體與帶有單羧酸的中間產物在EDC·HCl的縮合作用下，得到基于VEGFR?2抑制劑索拉菲尼的光親和探針分子。本發明的索拉菲尼光親和探針分子制備方法簡單，易于實現，并且收率較高。本發明的索拉菲尼小分子光親和探針能夠用于確證索拉菲尼的作用靶標以及驗證光親和標記技術在確證小分子靶標方面的可行性。

技術領域

本發明涉及一種基于VEGFR-2抑制劑索拉菲尼的光親合探針分子及其制備方法。

背景技術

光親和標記技術(PAL)是結合現代分子生物學、細胞生物學、藥物化學、分析化學等多學科的優勢，運用合成的光親和探針分子，在特定波長光的照射下產生高活性的中間體，其可以直接與藥物分子特異性結合的蛋白質進行不可逆共價交聯從而實現對藥物靶標蛋白分子的捕獲。它是分子水平上研究配體與受體相互作用的核心工具之一，對闡明配體與受體相互作用機理以及藥物新靶點的發現都有著巨大的推動作用。

近些年來這項技術主要應用于藥物分子靶標蛋白的確證，其主要基于光交聯技術、生物正交技術以及相關的生物分析技術等，實現藥物分子靶標的捕獲及其確證。其中光親和探針分子的設計合成是在不影響靶頭藥物活性的基礎上直接進行結構修飾，分別引入光反應活性基團以及生物正交手柄設計合成光親和探針分子，其在特定波長光的照射下特異性不可逆的共價捕獲靶頭化合物的靶標蛋白。再接下來通過生物正交反應來實現所捕獲的靶標蛋白的識別確證。

血管內皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor receptor)是由VEGF基因表達的膜蛋白，屬于酪氨酸家族蛋白，是與惡性腫瘤密切相關的大分子蛋白。血管內皮生長因子及其受體在一系列腫瘤細胞中都有過表達，該受體家族包括三個亞型：VEGFR-1、VEGFR-2、VEGFR-3。其中VEGFR-2主要參與血管內皮細胞的增殖，在癌細胞中分布也最廣泛。一系列的研究證實它可以作為有效的藥物靶標。

近五年以來，文獻中所報道的光活性基團有芳基疊氮、二苯甲酮、含取代基的雙吖丙啶、雙吖丙啶這四大類。其中，光交聯活性較好的是雙吖丙啶。因此選擇雙吖丙啶作為光活性基團設計合成光親和探針分子。

發明內容

本發明的目的在于提供一種基于VEGFR-2抑制劑索拉菲尼的光親合探針分子及其制備方法，索拉菲尼光親和探針分子用于確證索拉菲尼的靶標蛋白以及其與靶標蛋白的作用模式。并且可以用于驗證光親和標記技術在靶標蛋白確證方面的可行性。

為達到上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種基于VEGFR-2抑制劑索拉菲尼光親和探針分子，其結構式如下：

其中X＝O或NH。

一種基于VEGFR-2抑制劑索拉菲尼光親和探針分子的制備方法，包括以下步驟：

1)索拉菲尼在NaOH堿性條件下酰胺鍵水解得到帶有單羧酸的中間產物；

2)含有光親和基團雙吖丙啶與炔基的鏈接體與帶有單羧酸的中間產物在EDC·HCl的縮合作用下，得到基于VEGFR-2抑制劑索拉菲尼的光親和探針分子，結構式如下：

其中X＝O或NH。

本發明進一步的改進在于，所述步驟1)的具體過程為：將索拉菲尼、NaOH溶于無水乙醇中，80℃密閉條件下反應8h進行處理，得到帶有單羧酸的中間產物。

本發明進一步的改進在于，將索拉菲尼0.2151mmol與NaOH 3.227mmol溶于3mL無水乙醇溶液中，N₂保護，80℃反應8h后進行處理，得到帶有單羧酸的中間產物。