[發明專利]基于器官芯片的二甲雙胍對糖尿病腎病保護作用評價方法在審
| 申請號： | 201811477420.3 | 申請日： | 2018-12-05 |
| 公開（公告）號： | CN111269829A | 公開（公告）日： | 2020-06-12 |
| 發明（設計）人： | 秦建華;陶婷婷;李中玉;張敏 | 申請（專利權）人： | 中國科學院大連化學物理研究所 |
| 主分類號： | C12M3/00 | 分類號： | C12M3/00;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 沈陽晨創科技專利代理有限責任公司 21001 | 代理人： | 張晨 |
| 地址： | 116023 *** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 器官 芯片 二甲雙胍 糖尿病腎病 保護 作用 評價 方法 | ||
1.一種器官芯片，其特征在于：該器官芯片由上層帶結構PDMS芯片(10)和下層無結構PDMS芯片(11)通過不可逆封接鍵合；
所述上層帶結構PDMS芯片(10)包括細胞加樣池(1)，膠原加樣池(2)，培養基加樣池(3)，廢液回收池(4)，細胞出樣池(5)，細胞培養室(6)，培養基灌流室(7)，細胞球捕獲槽(8)，細胞遷移室(9)；
所述細胞培養室(6)上端與細胞加樣池(1)相連，下端與細胞出樣池(5)相連；
所述培養基灌流室(7)上端與培養基加樣池(3)相連，下端與廢液回收池(4)相連，所述培養基灌流室(7)與細胞遷移室(9)處交界面為細胞球捕獲槽(8)。
2.根據權利要求1所述的器官芯片，其特征在于：所述細胞培養室(6)和培養基灌流室(7)高度為200～300μm，細胞遷移室(8)高度為60～120μm。
3.按照權利要求1所述的器官芯片，其特征在于：所述細胞遷移室(9)灌注后膠原固化后，形成細胞捕獲槽(8)。
4.一種基于器官芯片的二甲雙胍對糖尿病腎病保護作用評價方法，其特征在于采用權利要求1所述芯片，具體步驟如下：
(1)從細胞加樣池(1)加入原代大鼠腎小球微組織懸液，腎小球進入細胞培養室(6)，經側立10分鐘后腎小球微組織落入細胞捕獲槽(8)，小球貼側壁在細胞捕獲槽(8)內靜置培養48h后，通入葡萄糖、葡萄糖和二甲雙胍的培養基灌流培養96h，建立體外糖尿病模型和二甲雙胍治療組；
(2)通過采用細胞免疫熒光染色，實時熒光定量PCR等技術，檢測氧化應激產物，細胞外緊密連接蛋白破壞蛋白和基因變化，通過細胞遷移室(9)，定量腎小球足細胞和內皮細胞的上皮細胞的間質化行為。
5.按照權利要求3所述的基于器官芯片的二甲雙胍對糖尿病腎病保護作用評價方法，其特征在于：所述體外糖尿病腎小球模型中葡萄糖濃度為10～30mM。
6.按照權利要求3所述的基于器官芯片的二甲雙胍對糖尿病腎病保護作用評價方法，其特征在于：所述二甲雙胍治療組中二甲雙胍濃度為50-150mM。
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