[發(fā)明專利]單體鏈霉親和素和高斯熒光素酶的融合蛋白及其應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201811473698.3 | 申請(qǐng)日： | 2018-12-04 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN111269323B | 公開（公告）日： | 2022-02-22 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 李靜;王佑富;鄭越;董宇亮;章文蔚;徐崇鈞 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 深圳華大智造極創(chuàng)科技有限公司 |
| 主分類號(hào)： | C07K19/00 | 分類號(hào)： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85;C12N5/10;G01N33/82 |
| 代理公司： | 深圳鼎合誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44281 | 代理人： | 孫銀行;彭家恩 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 單體 親和 熒光 融合 蛋白 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種單體鏈霉親和素和高斯熒光素酶的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包括單體鏈霉親和素全長(zhǎng)蛋白和高斯熒光素酶持續(xù)發(fā)光突變體，所述持續(xù)發(fā)光突變體序列如SEQ ID NO：3所示，所述單體鏈霉親和素全長(zhǎng)蛋白與所述高斯熒光素酶持續(xù)發(fā)光突變體通過柔性肽連接。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述單體鏈霉親和素全長(zhǎng)蛋白序列如SEQ ID NO：1所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述柔性肽序列如SEQ ID NO：4所示。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白還包括：信號(hào)肽，該信號(hào)肽用于引導(dǎo)所述融合蛋白從表達(dá)細(xì)胞內(nèi)向外分泌。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的融合蛋白，其特征在于，所述信號(hào)肽位于所述融合蛋白的N端。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的融合蛋白，其特征在于，所述信號(hào)肽序列如SEQ ID NO：5所示。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白還包括：融合標(biāo)簽，該融合標(biāo)簽用于親和純化所述融合蛋白。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合標(biāo)簽是6×組氨酸標(biāo)簽。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白序列如SEQ ID NO：7所示。
10.一種分離的核酸，其特征在于，所述分離的核酸編碼權(quán)利要求1所述的融合蛋白。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的分離的核酸，其特征在于，所述分離的核酸包括單體鏈霉親和素全長(zhǎng)蛋白編碼序列和高斯熒光素酶持續(xù)發(fā)光突變體編碼序列，所述持續(xù)發(fā)光突變體編碼序列如SEQ ID NO：10所示；所述單體鏈霉親和素全長(zhǎng)蛋白編碼序列與所述高斯熒光素酶持續(xù)發(fā)光突變體編碼序列通過連接序列連接。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離的核酸，其特征在于，所述單體鏈霉親和素全長(zhǎng)蛋白編碼序列如SEQ ID NO：8所示。
13.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離的核酸，其特征在于，所述連接序列如SEQ ID NO：11所示。
14.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離的核酸，其特征在于，所述分離的核酸還包括：信號(hào)肽編碼序列，該信號(hào)肽編碼序列編碼信號(hào)肽，該信號(hào)肽用于引導(dǎo)所述融合蛋白從表達(dá)細(xì)胞內(nèi)向外分泌。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分離的核酸，其特征在于，所述信號(hào)肽編碼序列位于所述分離的核酸的5’端。
16.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分離的核酸，其特征在于，所述信號(hào)肽編碼序列如SEQ IDNO：12所示。
17.根據(jù)權(quán)利要求11所述的分離的核酸，其特征在于，所述分離的核酸還包括：融合標(biāo)簽編碼序列，該融合標(biāo)簽編碼序列編碼融合標(biāo)簽，該融合標(biāo)簽用于親和純化所述融合蛋白。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分離的核酸，其特征在于，所述融合標(biāo)簽編碼序列是編碼6×組氨酸標(biāo)簽的序列。
19.根據(jù)權(quán)利要求10所述的分離的核酸，其特征在于，所述分離的核酸序列如SEQ IDNO：14所示。
20.一種表達(dá)載體，其特征在于，所述表達(dá)載體包括編碼權(quán)利要求1-9任一項(xiàng)所述的融合蛋白的核酸序列，以及載體骨架序列。
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