[發明專利]一種脂質體制備方法

有效

• 申請號: 201811464832.3
• 申請日: 2018-12-03
• 公開（公告）號: CN109394696B
• 公開（公告）日: 2020-12-01
• 發明（設計）人: 沈清明;戴葉能;蘇金中;范曲立
• 申請（專利權）人: 南京郵電大學
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K41/00;A61K31/704;A61K49/18;A61K49/08;A61K49/22;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇科專利代理有限責任公司 32102
• 代理人: 姚姣陽

本發明揭示了一種脂質體的制備方法，包括以下步驟，首先是合成二亞乙基三胺五乙酸衍生物，其次是合成具有兩親性分子的釓?二亞乙基三胺五乙酸?硬脂胺，然后是脂質體殼層的形成、藥物自組裝，最后是制備得到脂質體材料，本發明通過自組裝和納米沉淀的方法制備得到具有核殼結構的脂質體，工藝簡單、可重復性強，且形成的該脂質體顆粒尺寸均一，具有良好的水溶性、分散性和生物相容性，克服釓類小分子生物相容性差，組織特異性低，毒性大等缺陷，同時，利用近紅外光照射間接引發脂肪酸發生相轉變，可控地釋放出化療藥物，實現了多模態成像引導的協同治療。

技術領域

本發明涉及一種脂質體的制備方法，尤其涉及一種具有多功能特性的脂質體的制備方法，屬于生物醫學領域。

背景技術

磁共振成像(MRI)技術是利用原子核的磁共振效應衍生出的成像技術，具有空間分辨率高、軟組織對比度高、非侵入性和無電離輻射傷害等特點，因而被廣泛應用于臨床診斷和治療中。在臨床MRI中，多數診斷須用磁共振造影劑，磁共振造影劑是用來縮短成像時間、提高成像對比度和清晰度的一種成像增強對比劑，它能改變體內局部組織中水質子的馳豫速率、提高正常與患病部位的成像對比度。磁共振造影劑的發展也促進MRI技術日趨成熟。

另外，近年來，許多近紅外響應釋放藥物的多功能納米探針被開發用于癌癥的協同治療，例如：化療或光療，但這些納米探針在近紅外刺激下，僅能實現封裝藥物的持續釋放，而不能實現可控和按需釋放，造成病灶特異性低，治療效果差等問題。

然而，目前臨床使用最多的造影劑，如釓類造影劑、釓雙胺(Gd-DTPA-BMA,)1,4,7-三(叔丁氧羰甲基)-10-(乙酸)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷(Gd-DOTA)等都是小分子造影劑，屬于細胞外試劑，存在組織特異性較低，體內停留時間短，組織毒性較大等缺點。

綜上所述，如何提供一種脂質體的制備方法，應用于生物醫學，可以構建靶向特異性、低毒、生物相容的MRI造影劑，就成為本領域技術人員亟待解決的問題。

發明內容

本發明的目的在于提供了一種將兩種天然脂肪酸低共熔物構成的溫敏性脂質體與順磁性釓類兩親小分子相結合，通過包覆光熱/光動力試劑吲哚菁綠(ICG)與化療藥物阿霉素(DOX)，形成可用于生物醫學領域的磁共振成像的有機納米粒子，同時，利用近紅外光照射間接引發脂肪酸發生相轉變，可控地釋放出化療藥物，實現了多模態成像引導的協同治療。

本發明的技術解決方案是：

根據本發明的一個方面，提出一種脂質體制備方法，包括以下步驟：

S1:合成二亞乙基三胺五乙酸衍生物：將硬脂胺放入到氯仿中溶解形成4～10ml的硬脂胺的氯仿溶液；將二亞乙基三胺五乙酸雙酐放入到N,N-二甲基甲酰胺中溶解形成5～10ml的二亞乙基三胺五乙酸雙酐的N,N-二甲基甲酰胺溶液，再將硬脂胺的氯仿溶液緩慢加入到二亞乙基三胺五乙酸雙酐的N,N-二甲基甲酰胺溶液中，其中，硬脂胺與二亞乙基三胺五乙酸雙酐的摩爾比為2～4：1，并在40℃下攪拌2～3h后，置于4℃下冷卻2～3h，過濾得到二亞乙基三胺五乙酸-硬脂胺的白色沉淀，然后通過清洗劑清洗所述白色沉淀以除去未反應的二亞乙基三胺五乙酸雙酐和硬脂胺；

S2:合成具有兩親性分子的釓-二亞乙基三胺五乙酸-硬脂胺：將六水氯化釓的水溶液加入到檸檬酸鈉的水溶液中，其中，六水氯化釓與檸檬酸鈉的摩爾比為1:2～4，得到檸檬酸釓溶液；用緩沖液調節所述檸檬酸釓溶液的pH至中性，再將調節至中性后的檸檬酸釓溶液緩慢加入到熱的步驟S1中所述二亞乙基三胺五乙酸-硬脂胺水溶液中，其中金屬釓與二亞乙基三胺五乙酸-硬脂胺含量的比例為1～3:1，在N₂氣氛中室溫下攪拌反應2～4h后過濾產物，沉淀物干燥過夜，即得到釓-二亞乙基三胺五乙酸-硬脂胺；